[發明專利]一種組織培養中外植體消毒的方法

在審

• 申請號: 201610916689.1
• 申請日: 2016-10-21
• 公開（公告）號: CN106613951A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 耿冠宇;張素賢;吳慧;張云龍;楊小兵
• 申請（專利權）人: 定州市綠谷農業科技發展有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙)11562
• 代理人: 楊潤

技術領域

本發明涉及組織培養技術領域，更具體地說，涉及一種組織培養中外植體消毒的方法。

背景技術

植物組織培養用的外植體材料大部分取自田間，但因為在植物表面上附著大量的微生物。因此在植物材料接種前必須要進行消毒處理，目的是既要求把材料表面上的各種微生物殺滅，同時又不能損傷或只輕微損傷植物材料而不至于影響其生長。因此，外植體的消毒處理是植物組織培養工作中的重要的一環。

目前在組織培養中常用的外植體消毒過程中主要存在以下突出問題：外植體處理不當，導致外植體成活率低或外植體消毒不徹底，導致污染率高，影響了組培繁殖的效率和產量。

發明內容

有鑒于此，本發明提供一種組織培養中外植體消毒方法，該消毒方法對外植體消毒徹底，且損傷率降低。

一種組織培養中外植體消毒的方法，包括：

清洗干凈外植體表面，得到清洗后外植體；

將所述清洗后外植體浸泡在70％的酒精中，在第一設定溫度條件下超聲波震蕩第一預設時間，得到第一預處理外植體；

將所述第一預處理外植體浸泡在5％-10％的NaClO溶液中，在所述第一設定溫度條件下超聲波震蕩第二預設時間，得到第二預處理外植體；

將所述第二預處理外植體浸泡在無菌水中，在所述第一設定溫度條件下超聲波震蕩第二預設時間，得到第三預處理外植體；

沖洗所述第三預處理外植體，得到消毒后外植體。

優選地，清洗干凈外植體表面實現為：將外植體用自來水沖洗5-7次，再將所述外植體材料切成段或塊或片狀，自來水清洗外植體表面達到10-15min。

優選地，在第一設定溫度條件下超聲波震蕩第一預設時間實現為：

升溫至40℃，并在40℃條件下，同時利用120W的超聲波震蕩10-20s。

優選地，在所述第一設定溫度條件下超聲波震蕩第二預設時間實現為：

升溫至40℃，并在40℃條件下，同時利用120W的超聲波震蕩5-10min。

優選地，沖洗所述第三預處理外植體包括：利用無菌水沖洗所述第三預處理外植體材料10-15min。

從上述的技術方案可以看出，本發明實施例的組織培養中外植體消毒方法合理使用洗劑，并配合清潔/振動的技術，對外植體進行一系列消毒操作，由于時間、步驟及清洗劑配比的正確選擇，外植體清潔效果顯著且外植體存活率高，達到了提高清潔效果及降低損傷率的技術目的。

具體實施方式

下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

一種組織培養中外植體消毒方法，以實現對外植體消毒徹底，且損傷率降低的技術目的。

該組織培養中外植體消毒的方法，包括：

S11:清洗干凈外植體表面，得到清洗后外植體；

S12:將所述清洗后外植體浸泡在70％的酒精中，在第一設定溫度條件下超聲波震蕩第一預設時間，得到第一預處理外植體；

S13:將所述第一預處理外植體浸泡在5％-10％的NaClO溶液中，在所述第一設定溫度條件下超聲波震蕩第二預設時間，得到第二預處理外植體；

S14:將所述第二預處理外植體浸泡在無菌水中，在所述第一設定溫度條件下超聲波震蕩第二預設時間，得到第三預處理外植體；

S15:沖洗所述第三預處理外植體，得到消毒后外植體。

上述消毒方案，為了能夠消毒達到良好效果，包含多個消毒步驟，并采用不同清洗劑，以保證消除不同微生物的目的。同時，為了不影響外植體成活率不同清洗劑采用合適的配比以保證外植體植株安全。

如下：是針對以上步驟的優選方案，需要說明的是：如下方案作為優選，實驗人員可根據實際情況在合理范圍內選用，并不僅僅局限于此：

S11中：清洗干凈外植體表面實現為：

將外植體用自來水沖洗5-7次，再將所述外植體材料切成段或塊或片狀，自來水清洗外植體表面達到10-15min。

將外植體用自來水沖洗5-7次，以洗凈表面的灰塵等雜質。

S12中：在第一設定溫度條件下超聲波震蕩第一預設時間實現為：

升溫至40℃，并在40℃條件下，同時利用120W的超聲波震蕩10-20s。

S13-14中：在所述第一設定溫度條件下超聲波震蕩第二預設時間實現為：