[發明專利]Slc6a11基因及其蛋白的用途

有效

• 申請號: 201610915847.1
• 申請日: 2016-10-20
• 公開（公告）號: CN107974463B
• 公開（公告）日: 2023-02-17
• 發明（設計）人: 應悅;孫瑞林;匡穎
• 申請（專利權）人: 上海南方模式生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N15/877
• 分類號: C12N15/877;A01K67/027;C12Q1/6883;G01N33/68;G01N33/50
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 王正君;劉妍珺

1.一種痛覺耐受小鼠模型的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(a) 提供小鼠細胞，將所述細胞中的Slc6a11基因失活，得到Slc6a11基因失活的細胞；

(b) 利用步驟(a)中得到的Slc6a11基因失活的細胞，制備得到Slc6a11基因失活的痛覺耐受小鼠模型，

其中所述Slc6a11基因編碼的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的細胞為胚胎干細胞。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步驟(b)還包括步驟：

(b1) 利用所述的Slc6a11基因失活的細胞和一野生型囊胚，制備一嵌合囊胚；

(b2) 利用所述的嵌合囊胚，制備痛覺耐受小鼠模型。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述的步驟(b2)還包括步驟：

(i) 培養所述的嵌合囊胚，使其發育為嵌合體小鼠；

(ii) 將所述的嵌合體小鼠與野生型小鼠交配繁育，在后代中篩選獲得Slc6a11基因失活的雜合子小鼠；

(iii) 將所述的雜合子小鼠相互交配繁育，在后代中篩選獲得Slc6a11基因失活的純合子小鼠，即為所述的痛覺耐受小鼠模型。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，與野生型對照小鼠相比，所述的痛覺耐受小鼠模型具有痛覺耐受的特征，所述的痛覺耐受包括對熱痛、機械痛、炎癥疼痛和/或神經疼痛的敏感性降低。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(a)中，利用DNA同源重組技術，將所述Slc6a11基因中的一個或多個外顯子剔除或中斷，并用篩選標記替換，得到Slc6a11基因失活的小鼠細胞。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，將所述Slc6a11基因的外顯子1-3剔除并用篩選標記替換。

8.如權利要求1所述方法制備的小鼠模型的用途，其特征在于，用于制備痛覺不敏感的小鼠模型。

9.如權利要求1所述方法制備的小鼠模型的用途，其特征在于，用于篩選或鑒定可緩解痛覺的物質。

10.一種篩選或鑒定緩解痛覺的潛在治療劑的方法，包括步驟：

(a) 在測試組中，在測試化合物存在的條件下，將測試化合物施用于如權利要求1所述方法制備的小鼠模型，檢測測試組中所述小鼠模型對痛覺刺激的反應時間T1；在對照組中，在測試化合物不存在的條件下，將對照化合物施用于如權利要求1所述方法制備的小鼠模型，檢測對照組中所述小鼠模型對相同痛覺刺激的反應時間T2；

(b) 將上一步驟所檢測的反應時間T1和反應時間T2進行比較，從而確定所述測試化合物是否是緩解痛覺的潛在治療劑。

11.一種Slc6a11抑制劑的用途，其特征在于，用于制備構建痛覺耐受小鼠模型的制劑，所述的Slc6a11抑制劑抑制Slc6a11基因表達，或抑制Slc6a11蛋白的表達，

其中所述Slc6a11基因編碼的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示，并且所述Slc6a11蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示。