[發明專利]一種重組GP96-ScFv蛋白及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201610908560.6
• 申請日: 2016-10-18
• 公開（公告）號: CN107964039A
• 公開（公告）日: 2018-04-27
• 發明（設計）人: 陳音;樊敏杰;韓化敏;劉書磊;劉麗平
• 申請（專利權）人: 拜西歐斯（北京）生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K19/00;C07K1/22;A61K38/17;A61P37/00;A61P31/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司11204
• 代理人: 王達佐,洪欣

1.用于純化GP96蛋白和/或GP96蛋白-多肽復合體的親和樹脂，其包含共價連接的生物素化的GP96-ScFv蛋白和鏈霉親和素樹脂。

2.用于純化GP96蛋白和/或GP96蛋白-多肽復合體的親和層析柱，其裝填共價連接有生物素化的GP96-ScFv蛋白的鏈霉親和素樹脂。

3.GP96蛋白和/或GP96蛋白-多肽復合體純化試劑盒，其包含權利要求1所述的親和樹脂或權利要求2所述的親和層析柱。

4.如權利要求3所述的試劑盒，其還包含用于蛋白純化的平衡液、洗脫液和透析液中的至少一種。

5.制備用于純化GP96蛋白和/或GP96蛋白-多肽復合體的親和樹脂的方法，其包括下述步驟：

(1)重組表達含有純化標簽、GP96-ScFv和生物素化標簽的融合蛋白；

(2)利用所述純化標簽純化所述融合蛋白，任選地，在純化后從所述融合蛋白切除所述純化標簽；

(3)將步驟(2)中得到的融合蛋白生物素化；以及

(4)將步驟(3)中得到的生物素化的融合蛋白與鏈霉親和素樹脂連接。

6.純化GP96蛋白和/或GP96蛋白-多肽復合體的方法，包括將包含GP96蛋白和/或GP96蛋白-多肽復合體的樣品與權利要求1所述的親和樹脂接觸。

7.如權利要求6所述的方法，其中所述樣品來源于哺乳動物組織或細胞。

8.如權利要求7所述的方法，其中所述樣品來源于個體的腫瘤組織、非腫瘤病理組織、血液樣本中的細胞，或體外培養的被病原體感染的哺乳動物細胞或人細胞。

9.利用權利要求6所述的方法獲得的GP96蛋白和/或GP96蛋白-多肽復合體。

10.權利要求9所述的GP96蛋白和/或GP96蛋白-多肽復合體在制備用于治療和預防自身細胞變異、外源性病原體感染或自身免疫相關疾病的藥物中的用途。