[發明專利]一種紅心柯初代培養芽誘導方法

在審

• 申請號: 201610903545.2
• 申請日: 2016-10-17
• 公開（公告）號: CN106613948A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 黃文衛
• 申請（專利權）人: 柳州玲通科技有限責任公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司45114
• 代理人: 蘭如康

技術領域

本發明涉及紅心柯無性繁殖技術，尤其是一種紅心柯初代培養芽誘導方法。

背景技術

紅心柯（Lithocarpus carolinae(Skan)Rehd），系殼斗科（Fagaceae）柯屬（Lithocarpus）喬木，高約20米，胸徑40厘米，頂部芽鱗三角狀長披針形，當年枝有縱棱，干后暗黑褐色，二年生枝有散生的皮孔，枝、芽鱗、葉均無毛。葉厚紙質，長圓形，稀倒卵狀長橢圓形，長13-18厘米，寬4-6厘米，頂部尾狀短尖，基部楔尖，中脈在葉面微凸起，或上段平坦，側脈每邊15-20條，直達葉緣的齒端，或近葉緣處急彎向上，漸纖細而隱沒，在脈腋處有星狀小叢毛，葉緣下段全緣，上段鉆齒狀，兩面同色，干后暗褐色；葉柄長1.5-2厘米。殼斗每3或5個一簇，成熟殼斗淺盤狀，高10-15毫米，寬30-40毫米，基部有甚短的柄，殼壁上部較薄，下部厚約2.5毫米，包著堅果下半部，干后暗褐色，稍油潤，小苞片寬三角形，基部的呈菱形，中央脊肋狀縱向增厚，緊貼，覆瓦狀排列；堅果扁圓形，高24-30毫米，寬40-45毫米，果壁厚6-10毫米，頂部平坦，但中央稍凹陷，暗褐色，無毛，稍有光澤，果臍深2-4毫米，口徑25-30毫米，凹凸不平，中央部分略隆起。果期9-10月。紅心柯產云南南部至東南部（墨江、屏邊、金平）。生于海拔1500-2000米山地雜木林中。

目前，紅心柯資源仍處于野生分布狀態，但隨著保持植物多樣性的需求，規模化人工栽培紅心柯資源勢在必行。組織培養技術是一種快速無性繁殖技術，選擇紅心柯優良家系或者無性系為材料，通過組織培養方法繁殖苗木，既可以滿足生產上的數量要求，又可保持母本性狀。組織培養過程中，初代培養是制約組織培養順利進行的關鍵步驟，其中涉及了外植體的獲取、外植體的消毒、培養基選擇以及培養過程中培養體褐變、苗木玻璃化等重要問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能克服芽誘導過程中外植體褐變以及玻璃化等問題，提高芽誘導率，出芽指數以及萌芽生長狀況，獲取數量多、質量好的萌芽，從而滿足增殖培養的需要，促進紅心柯組織培養快速繁殖體系的建立的紅心柯初代培養芽誘導方法。

為了實現上述目的，本發明的技術方案如下：

一種紅心柯初代培養芽誘導方法，采用紅心柯基部萌條為外植體，通過外植體無菌處理后，將外植體接種于優質初代培養芽誘導培養基上，置于適宜的溫度、濕度和光照強度條件下進行培養，誘導芽的萌發；其操作步驟為，

（1）外植體選擇：選擇紅心柯基部萌發的半木質化的萌條為外植體；

（2）外植體消毒及接種：將紅心柯萌條經過洗潔精清洗，流水沖洗和化學試劑處理消毒后，剪切成莖段接入芽誘導培養基中；

（3）芽誘導培養：將接種后的外植體置于適宜室內條件下培養。

以上所述的芽誘導培養基其原料含量為：1/3～1/2改良WPM培養基+6-BA 1.0～2.0mg/L+活性炭10mg/L+乳糖5.0g/L+蔗糖20.0g/L。

以上所述的改良WPM培養基組分和體積重量比為：NH₄NO₃ 850 mg/L，CaCl₂·2H₂O 192 mg/L，MgSO₄·7H₂0 300 mg/L，KH₂PO₄ 250 mg/L，Ca(NO₃)₂·4H₂O 180 mg/L，KI 0.83 mg/L，H₃BO₃ 6.2 mg/L，MnSO₄·H₂O 22.4 mg/L，ZnSO₄·7H₂O 8.6 mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.25 mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.25 mg/L，Na₂·EDTA 37.3 mg/L，FeSO₄·7H₂O 27.8 mg/L，肌醇85 mg/L，煙酸1.0 mg/L，鹽酸吡哆醇1.0 mg/L，鹽酸硫胺素2.0 mg/L，甘氨酸2.0 mg/L。

以上所述的萌條是長為6~9cm、直徑0.2～0.4 cm的半木質化的萌條。