[發明專利]口蹄疫病毒病毒(FMDV)共有蛋白質、其編碼序列及由其制備的疫苗

有效

• 申請號: 201610894262.6
• 申請日: 2010-11-02
• 公開（公告）號: CN106987595B
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發明（設計）人: D·B·韋納;B·費拉羅;嚴健;P·A·布朗;R·A·鮑林;D·R·科恩;M·P·拉馬納坦;N·Y·薩德賽;K·穆圖瑪尼
• 申請（專利權）人: 賓夕法尼亞大學托管會;英諾維歐藥業股份有限公司
• 主分類號: C12N15/42
• 分類號: C12N15/42;C07K14/09;A61K39/135;A61P31/14
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陶家蓉

本文中提供了包含FMDV亞型A、Asia 1、C、O、SAT1、SAT2和SAT3的口蹄疫FMDV VP1?4外殼蛋白的共有蛋白質，其編碼序列及由其制備的疫苗。本文中還提供了使用上述疫苗產生抗一個或多個FMDV亞型的免疫反應的方法，以及辨別利用所述疫苗接種的哺乳動物和被FMDV感染的哺乳動物的方法。

發明領域

本發明涉及合成的共有(consensus)口蹄疫病毒(FMDV)免疫原性蛋白和編碼此類蛋白的核酸分子、抗FMDV的疫苗、用于誘導抗FMVD的免疫反應的方法、用于區分被FMDV感染的個體與已接種的抗FMDV的個體的方法以及預防性和/或治療性免疫個體以抗FMDV的方法。

發明背景

口蹄疫是馴養和野生偶蹄動物(包括牛、豬、山羊和鹿)的高度接觸性傳染病，其在宿主細胞中快速復制并且傳播至接觸易感性動物。該疾病的特征在于發熱、跛行以及舌、足、口鼻部和乳頭的水皰性病變，從而導致成年動物的高發病率但死亡率較低。病原體(causative agent)為口蹄疫病毒(FMDV)(細小RNA病毒科的口瘡病毒屬的種的類型)。FMDV為由二十面體衣殼(具有4種結構蛋白VP1-4，每一種蛋白60個拷貝)包圍的約8500個堿基的單鏈正義RNA基因組并且在抗原性上高度可變，具有幾個亞型(包括A、Asia 1、O、C、SAT1、SAT2和SAT3)。最近口蹄疫在許多先前無疾病國家或地區(包括1997年在中國臺灣地區、2001年在英國和荷蘭的暴發)以及在幾個南美國家的出現已提高了對該經濟破壞性病毒的認識。此外，全世界都在關注可能的恐怖分子襲擊可能利用FMDV攻擊例如1000億美元/年畜牧業的國家。

先前控制FMDV的措施包括宰殺感染的或接觸傳染病的動物和排除污染。如果國家在最近暴發后3個月呈現無FMDV狀況，則因FMDV暴發而宰殺它們的家畜的國家才可有重新開始家畜活動。國家通常將接種動物以治療FMDV暴發用作最后一著，因為已接種動物并且未宰殺動物的國家必須等待整整一年來恢復無FMD狀態。然而國家期望在任何FMDV暴發之前接種它們的動物并且能夠保持它們的無FMD狀態。

過去，FMDV疫苗包括化學滅活的完整病毒抗原和佐劑；然而，對此存在不利方面，因為其需要昂貴的高污染制造設施來生產疫苗。在過去25-30年中，研究者一直努力開發在單次接種后提供保護作用的疫苗。這些努力包括從病毒顆粒純化的VP1、生物工程改造的VP1、VP1肽、化學合成VP1肽、表達VP1表位的活載體的使用、利用編碼VP1表位的DNA的接種以及使用從FMDV感染的培養物產生的全長衣殼蛋白VP1-4或通過復制缺陷型人腺病毒5型(Ad5)載體進行的VP1-4的遞送。所有這些方法僅給接種的動物提供有限數量的跨所有FMDV病毒亞型的表位。

因此，在本領域存在對診斷FMDV感染的哺乳動物的疫苗和方法的需要，所述疫苗和方法適合于提供抗跨FDMV的不同亞型的多個表位的保護作用。

發明概要

本文中提供了分離的核酸，所述核酸包含編碼口蹄疫病毒亞型A、Asia 1、C、O、SAT1、SAT2、SAT3、SAT4的VP1-4的共有氨基酸序列的序列或其互補序列。所述核酸可包括選自(a)SEQ ID NO:17-23；(b)編碼24-30的氨基酸序列的核苷酸序列；(c)(a)的80％變體；和(a)或(b)的互補序列的序列。還提供了包含異源序列的載體，其中所述異源序列由上述序列組成。