[發(fā)明專利]分子印跡二氧化硅磁性凹凸棒土的制備并將其應(yīng)用于識(shí)別酪氨酸對映體

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610887651.6
• 申請日: 2016-10-11
• 公開（公告）號: CN106378097B
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孔泳;顧嘉衛(wèi);仝志方;沈健;袁喬
• 申請（專利權(quán)）人: 常州大學(xué);江蘇蒙彼利生物科技有限公司
• 主分類號: B01J20/22
• 分類號: B01J20/22;B01J20/28;B01J20/30;B01D15/08;G01N21/33
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本發(fā)明涉及一種采用分子印跡二氧化硅磁性凹凸棒土并將其應(yīng)用于識(shí)別酪氨酸對映體的方法，包括以下步驟：制備磁性納米凹凸棒土、制備分子印跡二氧化硅磁性凹凸棒土、識(shí)別酪氨酸對映體。本發(fā)明的有益效果：分子印跡磁性凹凸棒土的制備方法成本低，制備過程環(huán)保無污染，凹凸棒土較大的比表面積可以增加印跡位點(diǎn)的數(shù)量，從而提高對于酪氨酸對映體的選擇性吸附。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種采用分子印跡二氧化硅磁性凹凸棒土并將其應(yīng)用于識(shí)別酪氨酸對映體的方法，屬于生物技術(shù)和材料研究領(lǐng)域。

背景技術(shù)

手性選擇性是在生命過程中的必然規(guī)律，在生物體內(nèi)手性物質(zhì)被代謝、攝取等這一系列的過程中往往就會(huì)涉及到選擇性；除此之外，不同構(gòu)型的手性物質(zhì)在生物體內(nèi)所起到的作用是不一樣的，比如L型氨基酸是人體內(nèi)蛋白質(zhì)的主要組成部分，最新研究證明某些D型氨基酸可以作為神經(jīng)調(diào)制和神經(jīng)遞質(zhì)存在于人體內(nèi)。因此，建立一個(gè)廉價(jià)、高效、靈敏的手性分析方法是很有必要的。

分子印跡技術(shù)是一種對于目標(biāo)分子具有特異性識(shí)別的技術(shù)，對于目標(biāo)分子它具有選擇性分離、提取的能力而受到廣大關(guān)注。根據(jù)模板分子于單體分子以共價(jià)鍵與非共價(jià)鍵的方式結(jié)合之后，加入交聯(lián)劑使得單體分子交聯(lián)而包埋進(jìn)入聚合物內(nèi)部，最終可以通過洗脫等方式將模板分子脫出而形成的“空穴”對于目標(biāo)分子具有較高的選擇性。溶膠-凝膠技術(shù)是將印跡模板引入到無機(jī)物內(nèi)部，然后通過無機(jī)物水解以及洗脫得到分子印跡功能材料，該方法能夠有效地克服了有機(jī)聚合物溶脹率高、機(jī)械性能差的缺點(diǎn)。將分子印跡技術(shù)與溶膠-凝膠技術(shù)聯(lián)用能夠得到更多高效的識(shí)別位點(diǎn)。

硅材料由于其良好的物理化學(xué)性能而得到許多研究者的青睞；由于凹凸棒土是一種具有大比表面積的天然資源，因此將其作為載體，以四乙氧基硅烷(TEOS)、氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)作為單體，L-酪氨酸作為模板制得的分子印跡磁性凹凸棒土對于酪氨酸對映體具有較高的選擇性吸附能力。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明涉及一種采用分子印跡二氧化硅磁性凹凸棒土并將其應(yīng)用于識(shí)別酪氨酸對映體的方法，包括以下步驟：

a、制備磁性納米凹凸棒土：配制質(zhì)量比為1:20的凹凸棒土與去離子水的分散液，用100mL含有0.3M的鹽酸活化凹凸棒土分散液，在75℃反應(yīng)，抽濾、洗滌，從而得到酸活化的凹凸棒土。稱取2g活化凹凸棒土、4.72g FeCl₃·6H₂O以及1.72g FeCl₂·4H₂O于去離子水中，超聲分散后，攪拌以形成一個(gè)穩(wěn)定的體系，控制溫度為70℃，逐滴滴加10mL氨水，反應(yīng)45min后進(jìn)行磁性分離、去離子水洗滌，得到磁性納米凹凸棒土。

b、制備分子印跡二氧化硅磁性凹凸棒土：配制包括0.5g十六烷基三甲基溴化銨、2.8mL氨丙基三乙氧基硅烷、2.8mL正硅酸四乙酯和20mg L-酪氨酸的混合溶液，然后，稱取步驟a制得的磁性納米凹凸棒土20mg加入到上述配制的混合溶液中，滴加4mL氨水，攪拌12h。待反應(yīng)結(jié)束之后，配制乙酸與乙醇的混合比例為1:9中進(jìn)行L-酪氨酸(模板分子)的洗脫，得到分子印跡磁性凹凸棒土。

c、識(shí)別酪氨酸對映體：將步驟b中制得的分子印跡二氧化硅磁性凹凸棒土置于含有1mML-/D-酪氨酸的磷酸鹽緩沖溶液(pH＝7)中吸附一段時(shí)間之后，取上層清液于紫外分光光度計(jì)中進(jìn)行檢測，最終計(jì)算得到吸附量。

進(jìn)一步，步驟a中反應(yīng)溫度為70℃，氨水的量為10mL，反應(yīng)時(shí)間為45min。

進(jìn)一步，步驟b中氨丙基三乙氧基甲硅烷、正硅酸四乙酯和氨水的量分別為2.8mL、2.8mL、4mL，乙酸與乙醇混合比為1:9，

進(jìn)一步，步驟c中L-/D-酪氨酸的濃度為1mM，磷酸緩沖液的pH值7。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明進(jìn)一步說明。

圖1為酪氨酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線。