[發明專利]用于制備免疫球蛋白的方法

有效

• 申請號: 201610873254.3
• 申請日: 2016-09-30
• 公開（公告）號: CN107880116B
• 公開（公告）日: 2023-02-03
• 發明（設計）人: 佩雷·里斯托爾德巴爾特;薩爾瓦多爾·格蘭沙加蒙;胡安·伊格納西奧·霍爾克拉捏托;瑪麗亞·默西迪絲·法羅托瑪斯;紐莉亞·喬巴基立福
• 申請（專利權）人: 蓋立復集團公司
• 主分類號: C07K16/00
• 分類號: C07K16/00;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 李平;鄭霞

本發明涉及用于制備免疫球蛋白溶液的方法，所述方法是在聚醚或二醇聚合物的存在下基于具有大于或等于96％純度的免疫球蛋白的初始溶液，特征在于所述方法包括以下步驟：a)向所述初始溶液加入辛酸或其鹽；b)調整在步驟a)中獲得的溶液的pH；c)在滅活包膜病毒必需的溫度孵育在步驟b)中獲得的溶液持續滅活包膜病毒必需的時間；和d)對在步驟c)中獲得的溶液進行超濾/滲濾的步驟。

技術領域

本發明涉及用于制備免疫球蛋白的新方法。獲得的免疫球蛋白組合物適合于，例如，腸胃外施用。

背景技術

免疫球蛋白是可以可溶形式見于脊椎動物的血液和其他體液中的糖蛋白，并被免疫系統使用以識別和中和異物諸如細菌、病毒或寄生蟲。免疫球蛋白具有多種醫學應用，諸如診斷疾病、治療性處理(therapeutic treatment)和產前治療。免疫球蛋白的最常見治療性應用可以分為三個大組的病理學：原發性免疫缺陷(體液免疫缺陷)、繼發性免疫缺陷或獲得性免疫缺陷(例如，在預防和治療病毒感染中)和自體免疫缺陷(抗體的發育)。

免疫球蛋白可通過多種途徑施用，諸如肌內、靜脈內和皮下途徑等等。在其中，優選地使用靜脈內途徑，因為該途徑提供許多益處，特別是更大的治療效力。

免疫球蛋白通常通過使用基于以下的程序從人類血漿純化：Cohn分級方法(CohnEJ.等,J Am Chem Soc,1946,62,459-475)、Cohn-Oncley方法(Oncley JL.等,J Am ChemSoc,1949,71,541-550)或其他基于冷乙醇分級的等同方法，例如Kistler-Nitschmann方法(Kistler P,Nitschmann H,1962,7,414-424)。如此，使用通過以上任一方法獲得的富含免疫球蛋白的級分(諸如級分II+III、或級分II、或沉淀A、或γ球蛋白GG沉淀)。已引入修飾以更徹底地純化免疫球蛋白(IgG)并使它們對于施用，優選地靜脈內施用是可耐受的。所述修飾已被引入，例如，以去除聚集體和其他雜質，以及確保產物的安全性。然而，向用于制備免疫球蛋白的程序加入多個步驟減少了程序的產率并增加制造成本。對于免疫球蛋白產品，主要是用于靜脈內施用的免疫球蛋白產品日益增加的需求已經使得產率在工業規模生產它們的方法中成為關鍵方面。

在現有技術描述的方法之中，用于獲得經由靜脈內途徑可耐受的免疫球蛋白組合物的程序包括使用以下步驟的那些：用聚乙二醇(PEG)沉淀，離子交換色譜、具有病毒滅活能力的物理/化學方法，或用酶處理和免疫球蛋白分子的部分化學修飾。

如此，必需通過實施具有消除病原性生物因子(pathogenic biological agent)的能力的穩健步驟來確保產物的安全性。通常使用的方法包括使用溶劑/去垢劑以滅活具有脂質包膜的病毒，因為這不會嚴重地減少蛋白的生物活性。然而，考慮到溶劑/去垢劑混合物的毒性，該試劑必須在獲得最終產物之前被徹底地消除，且這增加了方法所需的時間并減少產率。對于消除所述溶劑/去垢劑描述的程序并不簡單且通常要求使用色譜吸附技術，直接通過疏水相互作用或通過在離子交換樹脂中間接捕獲免疫球蛋白和分離未捕獲的溶劑/去垢劑。在所有情形中，所述方法是昂貴和費力的，涉及蛋白的顯著損失。

然而，具有滅活病毒的能力的更簡單高效的替代處理是本領域已知的。例如，已經使用辛脂肪酸(caprylic fatty acid)(還稱為辛酸(octanoic acid))或其鹽。

在專利US4446134中，辛酸鈉聯合氨基酸和熱處理用作用于制備因子VIII的方法中的病毒滅活程序。盡管認為能夠分解脂質膜的殺病毒劑是未解離的辛酸(undissociatedcaprylic acid)，但根據酸及其離子形式的溶液以后者的名字即辛酸鹽(caprylate))表示的生化命名法，使用所述劑的程序通常稱為辛酸鹽滅活。