[發明專利]H3亞型流感病毒血凝素特異性保守表位、其抗體及其應用

有效

• 申請號: 201610862674.1
• 申請日: 2016-09-28
• 公開（公告）號: CN107868121B
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: 王健偉;郭麗;周紅莉
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院病原生物學研究所
• 主分類號: C07K14/11
• 分類號: C07K14/11;C07K16/10;C07K16/06;G01N33/68;G01N33/569;A61K39/42;A61P31/16
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 張廣育;孫占華

本發明涉及H3亞型流感病毒血凝素特異性保守表位，與所述表位特異性結合的抗體，以及所述表位用于診斷H3N2病毒感染的用途。

技術領域

本發明涉及H3亞型流感病毒血凝素特異性保守表位，與所述表位特異性結合的抗體，以及所述表位用于診斷H3N2病毒感染的用途。

背景技術

流感病毒是導致急性上呼吸道感染的主要病原，感染者具有較高的發病率和死亡率。據WHO統計，每年的流感疫情導致大約300-500萬人致嚴重疾病，其中大約25-50萬人死亡(參見：WHO.Fact sheet Number 211.Influenza(Seasonal).http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs211/en/,2014)。每年的流感疾病負擔相當一部分是由兩種共同流行的A型流感病毒-H1N1和H3N2-所致。據美國1979-2001的一項調查顯示，H3N2是導致流感病毒發病和死亡的最主要流感病毒亞型，其次是H1N1和B型流感病毒(參見ThompsonWW,et al.Influenza-associated hospitalizations in the United States.JAMA,2004,292:1333-40)。

流感病毒快速進化、適應新的宿主和逃避宿主免疫的能力，使得其可以在人間持續流行(Taubenberger JK,et al.Influenza virus evolution,host adaptation,andpandemic formation.Cell Host Microbe,2010,7:440-51)。流感病毒表面有兩種糖蛋白，血凝素(HA)和神經氨酸酶(NA)，它們是宿主針對流感病毒免疫反應的主要靶標。宿主蛋白酶將HA切割成HA1和HA2兩個亞單位，HA1與宿主受體結合，HA2負責病毒包膜與宿主內吞體膜的結合(Krystal M,et al.Evolution of influenza A and B viruses:conservationof structural features in the hemagglutinin genes.Proc Natl Acad Sci U S A,1982,79:4800-4)。HA1亞單位氨基酸的改變將會干擾宿主抗體對病毒的識別，而HA2亞單位在HA亞組中則是相對保守的。

H3N2流感病毒是導致季節性流感的病毒之一，在高危人群中導致嚴重疾病和死亡。研究表明，機體感染流感病毒后會產生針對不同株和亞型流感病毒的交叉反應性抗體(Noisumdaeng P,et al.Homosubtypic and heterosubtypic antibodies againsthighly pathogenic avian influenza H5N1 recombinant proteins in H5N1 survivorsand non-H5N1 subjects.Virology,2014,454-455 254-62)。而且，H3N2和H7N9病毒之間也存在雙向交叉反應(Guo L,et al.Cross-reactivity between avian influenza A(H7N9)virus and divergent H7subtypic-and heterosubtypic influenza A viruses.SciRep,2016,6 22045)。不同亞型的流感病毒，例如季節性流感和禽流感，可以導致患者產生不同臨床后果。因此，對H3N2流感病毒感染的診斷應該考慮到不同亞型流感病毒之間的交叉反應，所以應發展H3N2流感病毒感染的特異性診斷方法。然而，H3N2流感病毒持續進化，這使得鑒定H3亞型特異性保守型表位以用于H3N2流感病毒的特異性診斷尤為重要。

在本研究中，我們成功鑒定了兩個在H3N2中高度保守的特異性表位。在此基礎上，我們建立了基于特異性表位的H3N2病毒免疫熒光檢測方法和IgG ELISA檢測方法，IgGELISA檢測方法與血凝抑制檢測方法具有良好的相符性。

發明內容