[發(fā)明專利]一種磁性DNA超分子水凝膠的制備方法及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610860783.X | 申請日： | 2016-09-28 |
| 公開（公告）號： | CN106397796B | 公開（公告）日： | 2019-02-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 畢賽;岳淑珍;王宗花 | 申請（專利權(quán)）人： | 青島大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/00 | 分類號： | C12N15/00 |
| 代理公司： | 濟南圣達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221 | 代理人： | 鄭平 |
| 地址： | 266071 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 超分子水凝膠 水凝膠 制備 氧化石墨烯 粘性末端 應(yīng)用 三磷酸腺苷 表面形成 成功應(yīng)用 定量檢測 復(fù)雜儀器 檢測結(jié)果 通用性強 藥物載體 比色法 連接體 堆疊 吸附 裸露 簡易 雜交 直觀 檢測 吸收 | ||
1.一種磁性DNA超分子水凝膠，其特征在于，包括：
摻雜有磁性氧化石墨烯的DNA超分子水凝膠；
其中，所述DNA超分子水凝膠吸附在磁性氧化石墨烯表面；
所述DNA超分子水凝膠由Y-DNA和L-DNA的粘性末端互補雜交自組裝而成，其中，Y-DNA為三條單鏈Y1、Y2、Y3構(gòu)建的Y型DNA單體；L-DNA為兩條單鏈L1、L2構(gòu)建的連接體DNA單體；
所述Y-DNA、L-DNA和磁性氧化石墨烯的摩爾比為300~600：900~1800：1~2。
2.一種如權(quán)利要求1所述的磁性DNA超分子水凝膠的制備方法，其特征在于，包括：
將磁性氧化石墨烯、Y-DNA、L-DNA分散于緩沖溶液中，混合均勻，恒溫反應(yīng)，即得。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述恒溫反應(yīng)的條件為35~37 oC下，反應(yīng)3~3.5 h；
所述磁性氧化石墨烯的具體制備方法如下：配制氧化石墨烯分散液、活化，與氨基磁珠反應(yīng)，即得；
所述緩沖溶液為PBS緩沖液，pH 7.0。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，
所述Y-DNA的寡核苷酸鏈序列為：
Y1：5'-CACGGACTTGGATCCGCATAACCATTCGCCGTAATG-3'；
Y2：5'-CACGGACTCATTACGGCGAATGTACCGAATCAGCCT-3'；
Y3：5'-CACGGACTAGGCTGATTCGGTAGTTATGCGGATCCA-3'；
所述L-DNA的寡核苷酸鏈序列為：
L1：
5'-AGTCCGTGGTAGGGCAGGTTGGGGTGACTGGTTGGTGTGGTTGG-3'；
L2：
5'-AGTCCGTGCCAACCACACCAACCAGTCACCCCAACCTGCCCTAC-3'。
5.一種負載抗腫瘤藥物磁性DNA超分子水凝膠，其特征在于，包括：
摻雜有磁性氧化石墨烯的DNA超分子水凝膠；
負載在所述的磁性DNA超分子水凝膠上的抗腫瘤藥物；
其中，所述DNA超分子水凝膠粘性末端吸附在所述磁性氧化石墨烯表面；
所述DNA超分子水凝膠由Y-DNA和L-DNA的粘性末端互補雜交自組裝而成，所述Y-DNA為三條單鏈Y1、Y2、Y3構(gòu)建的Y型DNA單體；所述L-DNA為兩條單鏈L1、L2構(gòu)建的連接體DNA單體；
其中，所述Y-DNA單體和L-DNA單體與磁性氧化石墨烯、抗腫瘤藥物的摩爾比為300~600：900~1800：1~2： 3×104~6×104；
所述抗腫瘤藥物為DOX、E-ADM、THP。
6.一種權(quán)利要求5所述的負載抗腫瘤藥物磁性DNA超分子水凝膠的制備方法，其特征在于，包括：
將磁性氧化石墨烯、Y-DNA、L-DNA、抗腫瘤藥物分散于緩沖溶液中，混合均勻，恒溫反應(yīng)，得負載抗腫瘤藥物的磁性DNA超分子水凝膠。
7.一種包覆辣根過氧化物酶HRP的磁性DNA超分子水凝膠，其特征在于，包括：
摻雜有磁性氧化石墨烯的DNA超分子水凝膠；
包覆在所述DNA超分子水凝膠中的辣根過氧化物酶HRP；
其中，
所述DNA超分子水凝膠粘性末端吸附在磁性氧化石墨烯表面；
所述DNA超分子水凝膠由Y-DNA′和L-DNA′的粘性末端互補雜交自組裝而成，所述Y-DNA′為三條單鏈Y1′、Y2′、Y3′構(gòu)建的Y型DNA單體；所述L-DNA′為兩條單鏈L1′、L2′構(gòu)建的連接體DNA單體；
構(gòu)成所述DNA超分子水凝膠的L-DNA'單體中，與Y-DNA′連接的單鏈DNA含有ATP適體序列；
其中，所述Y-DNA′單體和L-DNA′單體與磁性氧化石墨烯的摩爾比為300~600：900~1800：1~2。
8.一種權(quán)利要求7所述的包覆辣根過氧化物酶HRP的磁性DNA超分子水凝膠的制備方法，其特征在于，包括：
將辣根過氧化物酶HRP、磁性氧化石墨烯、Y-DNA′、L-DNA′分散于緩沖溶液中，混合均勻，恒溫反應(yīng)，即得。
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