[發明專利]一種鮑魚內臟新鮮程度的指紋圖譜檢測方法

有效

• 申請號: 201610858244.2
• 申請日: 2016-09-28
• 公開（公告）號: CN106645446B
• 公開（公告）日: 2020-03-17
• 發明（設計）人: 陳繼承;趙曉丹;陳莉;梁孝鋒;陳藝暉
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種鮑魚內臟新鮮程度的指紋圖譜檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟S1：對鮑魚內臟進行基于HS-SPME的處理得到鮑魚內臟樣品；

步驟S2：對氣相和質譜儀的參數進行設置，采集所述鮑魚內臟樣品的GC-MS譜圖信息；

步驟S3：采用PLS-DA法分析所述鮑魚內臟樣品的GC-MS譜圖信息，得出檢測結果；

其中，所述步驟S3中，采用PLS-DA法分析鮑魚內臟樣品的GC-MS譜圖信息，得出結果，具體包括以下步驟：

步驟S3-1：依據標準質譜圖庫對不同腐化程度的鮑魚內臟樣品的GC-MS 圖譜的成分進行檢索定性，采用面積歸一化法進行定量分析，提取樣品組分的共有信息，用共有化學成分的峰面積為指標，以不同腐化程度的鮑魚內臟樣品為類別對象，構建訓練樣本的自變量矩陣X，并設定分類變量矩陣Y ；

步驟S3-2：用PLS回歸方法對訓練樣本的自變量矩陣X 和分類變量矩陣Y 進行分解，并使得X和Y 的主成分最大程度的線性相關，其模型表示為：

X＝TP^T+E

Y＝UQ^T+F

其中，T和U分別為X和Y的得分矩陣，P和Q分別為X和Y的載荷矩陣，E和F分別為X和Y的殘差矩陣，上標T表示轉置運算；

步驟S3-3：將T和U作線性回歸：U＝TB，預測待測樣本時，根據P求出待測樣本x 的得分向量t，最終求得預測值y＝tBQ，根據y的值對待測樣本的分類進行判定，其中，回歸因子B＝(T^TT)^-1T^TU；

其中，所述步驟S2中，采集鮑魚內臟樣品GC-MS譜圖信息時，質譜條件包括：EI離子源；碰撞池能量設為40~80 eV；傳輸線溫度為200~250 ℃；離子源溫度為200 ℃；質量掃描范圍為35~500；

其中，所述步驟S2中，采集鮑魚內臟樣品GC-MS譜圖信息時，色譜條件包括：30 m×0.25mm×0.25 μm的DB-WAX石英毛細柱；升溫程序為先以35 ℃的溫度保持2 min，再以5 ℃/min升至120 ℃，保持2 min，繼續以10 ℃/min升至150 ℃，保持2 min，最后以20 ℃/min升至240 ℃，保持3 min；He載氣的流速為1 – 1.2 mL/min；分流比為1:10 – 40。

2.根據權利要求1所述的一種鮑魚內臟新鮮程度的指紋圖譜檢測方法，其特征在于：所述步驟S1中，對鮑魚內臟依次進行提取、富集、濃縮和解吸四個處理過程，具體為：將清洗干凈的放置不同時間條件的鮑魚內臟利用高速攪拌機打成漿狀，稱取一定的質量，在頂空瓶中按2:7 - 4:7的料液比加入飽和氯化鈉溶液，于一定預熱溫度T下預熱一段時間t，推動SPME手柄將萃取纖維頭伸入頂空瓶中，然后置于磁力攪拌加熱器中，在固定平衡溫度T₁下，在一定轉速R下保持一定的時間t₁，收回萃取纖維頭，從頂空瓶中取出SPME手柄，并插入到GC-MS的進樣口中，在氣相色譜進樣口解析一段時間t₂。

3.根據權利要求2所述的一種鮑魚內臟新鮮程度的指紋圖譜檢測方法，其特征在于：所述頂空瓶中內置有磁力轉子。

4.根據權利要求2所述的一種鮑魚內臟新鮮程度的指紋圖譜檢測方法，其特征在于：所述萃取纖維頭采用50/30μm的DVB/CAR/PDMS纖維頭，且所述萃取纖維頭在使用之前在進樣口溫度250 ℃的條件下老化1 h。

5.根據權利要求2所述的一種鮑魚內臟新鮮程度的指紋圖譜檢測方法，其特征在于：所述預熱溫度T為25 – 35℃，平衡溫度T₁為65 – 80 ℃，轉速R為75 –100 rad/min，時間t為10 – 20 min，t₁為40 – 60 min，t₂為5 min。