[發明專利]多聚陽離子?bFGF復合材料及其應用和制備方法

在審

• 申請號: 201610851885.5
• 申請日: 2016-09-27
• 公開（公告）號: CN107875394A
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 鄔芬贊;肖健;張宏宇;魏曉捷;童松林;李校堃
• 申請（專利權）人: 鄔芬贊
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;A61K38/18;A61K9/10;A61K47/36;A61P25/00;A61P25/28
• 代理公司: 寧波理文知識產權代理事務所(特殊普通合伙)33244
• 代理人: 羅京,孟湘明

技術領域

本發明涉及脊髓損傷修復領域，更進一步，涉及一多聚陽離子-bFGF復合材料及其應用和制備方法。

背景技術

血-脊髓屏障在脊髓損傷神經中樞性疾病中扮演重要的角色，可以限制和調節外界環境進入中樞神經系統，維持脊髓內微環境的穩定，在多種神經系統疾病的病理生理過程中發揮重要作用，是SCI創后難愈的重要原因。全球不同國家急性脊髓損傷的年發病率約每百萬人11.5～57.8例，給社會、家庭帶來巨大的痛苦和承重負擔。對脊髓損傷后血-脊髓屏障損傷的治療及其詳細機制的研究已成為近年來神經科學研究的熱點及難點。

脊髓損傷(Spinal cord injury,SCI)后血-脊髓屏障(Blood spinal cord barrier，BSCB)的破壞是造成繼發性SCI的重要原因。由血管內皮細胞，內皮細胞間的緊密連接，包裹其外的基底膜及星形膠質細胞終足組成的BSCB結構(圖1A，1B)可以限制和調節外界環境進入中樞神經系統，精細的調節脊髓內的液態微環境穩定，限制一些物質從血管轉運到脊髓微環境中，但是BSCB的結構和功能細節目前還不知道。研究顯示，由特化的內皮細胞及其緊密連接構成的血-脊髓屏障可以給正常神經元功能提供所需的穩定的微環境，可以有效的阻斷血漿蛋白等大分子的通透性，限制細胞溶質、離子和水的運動。基底膜和內皮細胞朝向實質的面保持著緊密的聯系，這個結構為內皮細胞提供了結構性支持。SCI后BSCB的破壞在組織和細胞的變化，以及再生和修復過程中都起著重要的作用。因此，研究SCI后血-脊髓屏障的變化和修復機制，有效的抑制內皮細胞的死亡，是保護神經元、促進SCI后修復和重建的首要目標和亟待解決的難題。

細胞自噬是由溶酶體介導的降解細胞內蛋白質或細胞器的代謝過程。細胞自噬已被證實與衰老、免疫和細胞死亡有關，并且在神經退行性疾病和惡性腫瘤的發病過程中也具有重要意義。值得注意的是，近期的研究表明SCI過程與細胞自噬密切相關。在受壓迫性損傷的脊髓組織中，自噬標志蛋白LC3顯著增加；在SCI的繼發性損傷相關的炎癥、缺血、缺氧等情況下，都有細胞自噬的激活。Kanno等研究表明在SCI模型中，包括神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞等有自噬性細胞死亡的發生。不過其具體機制和作用卻存在著顯著的差異，目前仍不明確。可見，細胞自噬在SCI中扮演著重要的角色，深入探討自噬在SCI血-脊髓屏障恢復中的作用必然具有著決定性的意義。

同時血-脊髓屏障(BSCB)破壞后炎癥反應的發生及擴散是SC I后繼發性損傷的中心環節之一。BSCB功能完整性遭到破壞后，對蛋白質的通透性發生變化可導致血管源性水腫形成，而炎性物質的釋放及轉運則促使脊髓暴露于炎癥細胞及介質的毒性作用下，進一步誘發和加重繼發性脊髓損傷，同時伴有BSCB的進一步破壞，形成惡性循環。脊髓損傷后血管周圍基底膜結構改變可促進炎癥因子進入脊髓實質，進而誘導炎癥反應擴大，還有如跨毛細血管內皮小泡運輸增加，細胞間緊密連接變寬等。因此研究BSCB破壞后炎癥反應是SCI后繼發性損傷的重要中心環節之一。

另有報道顯示自噬對炎癥具有調控作用(圖1A、1B)，在體外細胞實驗研究發現泛素化蛋白I-kBα的降解將誘發炎癥反應，而泛素化蛋白的降解與自噬過程密切相關，用自噬抑制劑氯喹抑制自噬可以抑制I-kBα的降解，抑制炎癥反應。此外，與自噬體膜形成的關鍵蛋白LC3相互作用的接頭蛋白p62能夠募集寡聚化蛋白及多聚泛素化蛋白到自噬體中通過自噬-溶酶體途徑降解。p62作為一種連接性蛋白，可通過羧基末端泛素結合位點與泛素化蛋白結合，同時擁有LC3結合位點，可以與自噬調節蛋白ATG8/LC3相互作用，通過p62的介導，越來越多的泛素化蛋白被發現可以通過自噬-溶酶體途徑而被選擇性的降解。不過，迄今泛素化蛋白I-kBα是通過何種途徑降解，以及自噬對泛素化蛋白I-kBα的具體調控作用還未被探討，尤其在血-脊髓屏障損傷修復中的意義研究甚少。