[發明專利]一種抗宿主凋亡的重組桿狀病毒載體

在審

• 申請號: 201610841372.6
• 申請日: 2016-09-22
• 公開（公告）號: CN106636207A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 許曉東;陳紅英;歐艷梅;徐可言
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: C12N15/866
• 分類號: C12N15/866;C12N15/66;A61K39/00
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司11385
• 代理人: 董芙蓉

1.一種抗宿主凋亡的重組桿狀病毒載體，其特征在于，該抗宿主凋亡的重組桿狀病毒載體含有一段特定的DNA序列，該DNA序列為SEQ ID NO：1。

2.如權利要求1所述的抗宿主凋亡的重組桿狀病毒載體，其特征在于，該DNA序列包括U6啟動子、與caspase-1同源的21nt核酸序列、9nt loop序列、與21nt核酸序列對應的21nt反義序列、作為轉錄終止信號的T(n)序列；

所述與caspase-1同源的21nt核酸序列為SEQ ID NO：2；

所述9nt loop序列為SEQ ID NO：3；

所述與21nt核酸序列對應的21nt反義序列為SEQ ID NO：4；

所述作為轉錄終止信號的T(n)序列為SEQ ID NO：5。

3.如權利要求2所述的抗宿主凋亡的重組桿狀病毒載體，其特征在于，所述U6啟動子作為siRNA表達的調控序列，該U6啟動子序列為SEQ ID NO：6。

4.一種權利要求1所述的抗宿主凋亡的重組桿狀病毒載體的構建方法，其特征在于，該抗宿主凋亡的重組桿狀病毒載體的構建方法為：將靶向Caspase-1小RNA的編碼序列直接插入到桿狀病毒基因組中；具體包括：

1)、擴增U6啟動子并克隆至載體質粒上；

2)、設計靶向caspase-1的shRNA序列，用長引物拼接的方法獲得shRNA片段；

3)、將shRNA片段克隆到U6啟動子下游；

4)、用PCR方法擴增帶U6-shRNA序列的反篩片段；

5)、將反篩片段與AcMNPV Bacmid共轉化到含pRed/ET的大腸桿菌HS996菌株，篩選獲得抗凋亡的Bacmid。

5.一種利用如權利要求1～3任意一項所述的抗宿主凋亡的重組桿狀病毒載體制備的蛋白制品。

6.一種利用如權利要求1～3任意一項所述的抗宿主凋亡的重組桿狀病毒載體制備的疫苗。