[發明專利]一種采用絮凝法制備谷胱甘肽亞銅鹽的方法

有效

• 申請號: 201610839296.5
• 申請日: 2016-09-22
• 公開（公告）號: CN106146610B
• 公開（公告）日: 2018-01-23
• 發明（設計）人: 鄭庚修;付凱;高令峰;楊修亮;王斌;韓歆雨;譚嘯峰
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: C07K5/037
• 分類號: C07K5/037;C07K1/30
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業)37240
• 代理人: 李茜

技術領域

本發明公開了一種采用絮凝法制備谷胱甘肽亞銅鹽的方法，屬于精細化工領域。

背景技術

還原型谷胱甘肽是一種具有重要生理活性的三肽，即r-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸(glutathione, GSH)，它廣泛分布于動物、植物和油料種子中。可作為保護酶和其它蛋白巰基的抗氧化劑，在生物氧化、氨基酸轉運、保護血紅蛋白等過程中起一定作用。另外，谷胱甘肽還具有抑制衰老、預防糖尿病、消除疲勞等作用，被譽為人體的“長壽因子和抗衰因子”。

目前報道的谷胱甘肽提取的方法很多。復旦大學的苑小林（苑小林, 等，鮮酵母中谷胱甘肽（GSH）分離純化的初步研究[J]. 藥物生物技術, 1998, 5(2): 89~91）利用有機汞的化學親和樹脂吸附GSH，濃縮結晶后回收率為83%；專利（申請號200610040606.3）“一種從谷胱甘肽發酵液中提取谷胱甘肽的方法”中使用001×7陽離子交換樹脂純化谷胱甘肽，濃縮結晶后，提取收率為80.5%。專利（申請號200610040606.3）使用001×7陽離子交換技術去除小分子物質，最終達到從發酵液中濃縮純化谷胱甘肽的目的，提取收率為80. 5%，但是該方法不能徹底的去除料液中的雜質與色素。專利（申請號200810233835）“一種谷胱甘肽的生產方法”使用微濾、陰離子樹脂、吸附樹脂、納濾得到純度較高的產品，但是工藝繁瑣不適于工業化生產。銅鹽法（卓肇文, 等，用改進的方法從酵母制取還原型谷胱甘肽（GSH）結晶[J]. 氨基酸雜志, 1988, 3:6~9），采用新鮮的Cu₂O提純谷胱甘肽粗提取液后濃縮結晶可以獲得約80%的收率，該方法也是現在工業生產中常用的提取方法，但是該方法中生成的亞銅鹽顆粒細碎粘稠，難過濾，且結晶包扎大量雜質，成為制約該方法大規模應用的關鍵因素。

發明內容

本發明的目的是為克服上述現有技術的不足，提供一種采用絮凝法制備谷胱甘肽亞銅鹽的方法，能夠有效降低能耗、提高產品收率和純度，提高經濟效益。該方法包括以下步驟：

（1）谷胱甘肽亞銅鹽初步生成

向破壁、分離后的谷胱甘肽酵母提取液中緩慢加入Cu₂O，150~200 rpm攪拌反應，得細碎谷胱甘肽亞銅鹽（GSCu）乳濁液；

（2）調節pH值

配制質量分數為0.5~1.0 %的硫酸溶液，緩慢加入步驟（1）所得乳濁液中，調節pH值至3.0~3.5；

（3）高速分散

將步驟（2）得到乳濁液加熱至45~50℃，然后用3000~5000 rpm的高速分散機分散2~3 min，得均一、無分層現象的混合液；

（4）絮凝

控制水浴溫度45~50 ℃，攪拌速度50~80 rpm，向步驟（3）所得混合液中緩慢加入絮凝劑聚丙烯酰胺，攪拌10~20 min；

經聚丙烯酰胺絮凝后，所述步驟（4）所得谷胱甘肽亞銅鹽平均粒度為400~600 μm；

（5）過濾洗滌

將步驟（4）得到的混合液通過板框壓濾進行固液分離，濾餅用0.2~0.5 %的硫酸溶液洗滌，收集濾餅即為大顆粒谷胱甘肽亞銅鹽。

所述步驟（1）中酵母發酵液中谷胱甘肽含量為1800 mg/L以上。

所述的步驟（4）中絮凝劑聚丙烯酰胺加入量為提取液質量的0.05~0.1%，加入方式為配制成質量分數為5~8%的水溶液緩慢加入。

所述步驟（5）中，板框壓濾機過濾介質為300~500目的滌綸濾布，進料壓力為0.5~0.8 MPa。

本發明的有益效果是：

本發明使用絮凝法分離提純制備高純度谷胱甘肽亞銅鹽，谷胱甘肽亞銅鹽通過有機高分子絮凝劑架橋、吸附、聯接作用形成絮凝體從而產生大分子沉淀，再通過固液分離得以除去絕大部分雜質，得到高純度的谷胱甘肽亞銅鹽。絮凝劑使液體中懸浮微粒谷胱甘肽亞銅鹽積聚變大，或形成絮團，從而加快離子的聚沉，達到快速固液分離的目的，采用絮凝法有效的解決了傳統工藝中的沉淀粘稠難過濾的技術難題，縮短了生產周期，提高了生產效率，具有較高的經濟效益。

具體實施方式

實施例1:

該方法的步驟如下:

(1)谷胱甘肽亞銅鹽初步生成

在35℃條件下，向裝有100L破壁、分離后的谷胱甘肽酵母提取液的反應釜中緩慢加入42 g Cu₂O，用時25min，攪拌速度為180 rpm，加料完畢攪拌20min，得細碎谷胱甘肽亞銅鹽（GSCu）乳濁液；

(2)調節pH值