[發明專利]一種近紅外熒光核酸銀納米簇及其制備方法和用途有效
| 申請號: | 201610837758.X | 申請日: | 2016-09-21 |
| 公開(公告)號: | CN107058299B | 公開(公告)日: | 2020-11-20 |
| 發明(設計)人: | 陳秋云;穆威宇;肖新新 | 申請(專利權)人: | 江蘇大學 |
| 主分類號: | C12N15/11 | 分類號: | C12N15/11;G01N21/64;C09K11/06 |
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| 地址: | 212013 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 紅外 熒光 核酸 納米 及其 制備 方法 用途 | ||
1.一種近紅外熒光核酸銀納米簇的制備方法,所述近紅外熒光核酸銀納米簇標記為Trp-DNA-AgNCs@BSA,以DNA序列5’CCCACCCACCCTCCCAACAACAGAGGAG3’為模板,于檸檬酸鈉緩沖溶液中,利用NaBH4還原AgNO3及色氨酸與BSA相互作用的方法,合成得到;這種核酸銀納米簇在熒光測定時設置激發波長為750 nm,得到發射波長800 nm的近紅外熒光,核酸銀納米簇的大小為70 nm,其近紅外熒光可用于細胞成像及血液中核酸的檢測,其特征在于,具體步驟如下:
以DNA序列5’CCCACCCACCCTCCCAACAACAGAGGAG3’為模板,在檸檬酸鈉緩沖液中加入DNA序列、色氨酸(Trp)和AgNO3,混合均勻后放置到水浴中,71℃加熱1-3 min,后緩慢降至室溫,降溫時間為1-2 h,加入NaBH4溶液將Trp-DNA-Ag+還原成Trp-DNA-Ag,轉移到4℃環境中避光放置1-3天,放置1-3天后加入牛血清蛋白(BSA)溶液,即可得到穩定的近紅外核酸銀納米簇。
2.如權利要求1所述的一種近紅外熒光核酸銀納米簇的制備方法,其特征在于,所述的檸檬酸鈉緩沖溶液的pH 值為5.0-6.0,濃度為10-20 mM,每1mL檸檬酸鈉緩沖液加入5-10μmol DNA。
3.如權利要求2所述的一種近紅外熒光核酸銀納米簇的制備方法,其特征在于,所述的檸檬酸鈉緩沖溶液的pH 值為5.0,濃度為10 mM,每1mL檸檬酸鈉緩沖液加入6μmol DNA。
4.如權利要求1所述的一種近紅外熒光核酸銀納米簇的制備方法,其特征在于,所述的DNA與Ag+的摩爾比為1: 20-1:40;所述的色氨酸與Ag+的摩爾比為1:1-1:2;所述的NaBH4與Ag+的摩爾比為1:1-4:1;所述的BSA與Ag+的摩爾比為1:50-1:80。
5.如權利要求4所述的一種近紅外熒光核酸銀納米簇的制備方法,其特征在于,所述的DNA與Ag+的摩爾比為1:33.33;所述的色氨酸與Ag+的摩爾比為1:1.33;所述的NaBH4與Ag+的摩爾比為2:1;所述的BSA與Ag+的摩爾比為1:66.67。
6.如權利要求1所述的一種近紅外熒光核酸銀納米簇的制備方法,其特征在于, 71℃加熱2 min;降溫時間為1.5 h;轉移到4℃環境中避光放置2天。
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