[發明專利]一種殺蟲蛋白及其核酸、制備方法和應用

有效

• 申請號: 201610836625.0
• 申請日: 2016-09-21
• 公開（公告）號: CN106632624B
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發明（設計）人: 張杰;束長龍;耿麗麗;李艷秋;曹蓓蓓;彭琪;宋福平;梁影屏
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C07K14/325
• 分類號: C07K14/325;C07K14/32;C12N15/32;C12N15/70;C12N15/82;A01H5/00;A01N63/50;A01P7/04;C12R1/19;C12R1/085;C12R1/07
• 代理公司: 北京聿華聯合知識產權代理有限公司 11611
• 代理人: 朱繪;劉烽

1.氨基酸序列如SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 4、SEQ IDNo. 5和SEQ ID No. 7所示的殺蟲蛋白中的至少一種在防治有害生物中的應用，其中，

所述有害生物為大猿葉甲（Colaphellus bowringii Baly）、小猿葉甲（Phaedonbrassicae Baly）、黃曲條跳甲（phyllotreta striolata）和榆藍葉甲（Pyrrhaltaaenescens）中的至少一種。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述殺蟲蛋白在活體生物中在16-20°C下表達。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述殺蟲蛋白在含有能夠翻譯為氨基酸序列如SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5和SEQ IDNo. 7所示的殺蟲蛋白中的至少一種的核酸的活體生物中表達。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，能夠翻譯為如SEQ ID No. 1所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 8所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 2所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 9所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 3所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 10所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 4所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 11所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 5所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQID No. 12所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 7所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ IDNo. 14所示。

5.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述活體生物為微生物。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述活體生物為芽孢桿菌（Bacillus）、假單胞菌（Pseudomonas）、腸桿菌（Escherichia）和酵母（Saccharomyces）中的至少一種。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述活體生物為蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis）、枯草芽孢桿菌（Bacilllus subtilis）、萎縮芽孢桿菌（Bacillus atrophaeus）和蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus）中的至少一種；所述假單胞菌包括熒光假單胞桿菌（Pseudomonas fluorescens）；所述腸桿菌包括大腸桿菌（Escherichia coli）。

8.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述微生物為野生微生物和/或遺傳工程微生物。

9.根據權利要求2至8中任意一項所述的應用，其特征在于，在所述活體生物中表達所述殺蟲蛋白后，還包括從所述活體生物中純化所述殺蟲蛋白的步驟。

10.能夠翻譯為如氨基酸序列如SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ IDNo. 4、SEQ ID No. 5和SEQ ID No. 7所示的殺蟲蛋白中的至少一種的核酸在構建防治有害生物的轉基因植物中的應用，其中，

所述應用為在構建防治大猿葉甲（Colaphellus bowringii Baly）、小猿葉甲（Phaedonbrassicae Baly）、黃曲條跳甲（phyllotreta striolata）和榆藍葉甲（Pyrrhaltaaenescens）中的至少一種的轉基因植物中的應用。

11.根據權利要求10所述的應用，其特征在于，能夠翻譯為如SEQ ID No. 1所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 8所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 2所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 9所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 3所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 10所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 4所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 11所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 5所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 12所示，能夠翻譯為如SEQ ID No. 7所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQID No. 14所示。