[發明專利]一種檢測果蔬中赤霉素的快速前處理方法

在審

• 申請號: 201610832938.9
• 申請日: 2016-09-20
• 公開（公告）號: CN106645507A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 丁曉雯
• 申請（專利權）人: 西南大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06
• 代理公司: 北京匯澤知識產權代理有限公司11228
• 代理人: 武君

技術領域

本發明屬于食品分析技術領域，涉及一種檢測果蔬中赤霉素殘留的快速前處理方法。

背景技術

赤霉素（gibberellic acid）又名赤霉素GA₃、九二○、奇寶，是一種應用廣泛的植物激素類農藥。美國、日本等國規定，植物源性食品中赤霉素最高殘留限量（MRL）為0.2 mg/kg。我國還未制定該物質的殘留限量標準。

目前，赤霉素的標準檢測方法主要是液相色譜法-質譜/質譜法（如SN/T 4257-2015 出口食品中抗倒酯、脫葉磷、坐果安、赤霉素農藥殘留量的測定；SN/T 0350-2012 出口水果中赤霉素殘留量的測定；DB22/T 1677-2012 豆芽中赤霉素殘留量的測定）。這類方法由于使用了先進的儀器，檢測結果具有極高的精密度和準確度，但都存在對樣本中目標物的分離、提取、濃縮等前處理步驟繁瑣、耗時的缺點，不僅影響測定結果的精密度和準確度，而且不利于大批量樣本的檢測。

目前，赤霉素的前處理方法主要是液液萃取法和固相萃取（Solid-Phase Extraction, SPE）法。液液萃取法由于操作繁瑣、耗時費力、消耗大量溶劑污染環境、回收率較低等缺陷，不能滿足現代檢測工作的需要，但在實際工作中仍然被應用。例如，“SN/T 0350-2012 出口水果中赤霉素殘留量的測定”中樣本的前處理就是以乙腈為溶劑從水果中提取赤霉素，然后用乙酸乙酯對乙腈提取液進行液液分配凈化處理，最后用液相色譜-質譜/質譜法進行檢測和確證，方法的低限為10μg/kg，回收率為70.0%-106.0%。固相萃取是近年來發展較快的一種樣品前處理技術，該技術可以有效提高測定的回收率而被廣泛應用。用C18柱進行赤霉素的前處理凈化在目前應用廣泛，有研究者用液液萃取結合固相萃取分離純化蔬菜樣品中的赤霉素，得到的檢出限為0.5 mg/kg；另有研究者用C18小柱萃取番茄樣品中的赤霉素，可有效除去基質干擾物，加標回收率達到88.45%-95.90%。但總體而言，目前國內外赤霉素分析檢測仍然存在前處理步驟繁瑣、耗時等缺點。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種檢測果蔬中赤霉素的前處理方法，可以加快赤霉素測定的前處理速度，進而全面提高該農藥分析檢測的速度，有助于推動我國農藥檢測方法朝快而準的方向發展。

為達到上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種檢測果蔬中赤霉素的快速前處理方法，包括以下步驟：

（1）將果蔬樣本的可食用部分打碎成勻漿；

（2）取步驟（1）所得勻漿，加入體積分數為85%的甲醇水溶液，超聲波處理，抽濾，濾液在水浴加熱條件下用氮氣吹至近干，再用體積分數為5%的甲醇水溶液稀釋并定容；

（3）取步驟（2）所得溶液，加至已活化的C₁₈固相萃取柱中，用體積比為40: 60的甲醇-水混合溶劑洗脫，洗脫液在水浴加熱條件下用氮氣吹至近干，再用甲醇稀釋并定容，過濾，濾液作為供試品溶液。

優選的，步驟（2）是取步驟（1）所得勻漿，按料液比為1g: 4.5mL加入體積分數為85%的甲醇水溶液，在功率為128 w的條件下超聲波處理45分鐘，抽濾，濾液在45℃水浴加熱條件下用氮氣吹至近干，再用體積分數為5%的甲醇水溶液稀釋并定容。

優選的，步驟（3）是取步驟（2）所得溶液，加至已活化的C₁₈固相萃取柱中，用體積比為40: 60的甲醇-水混合溶劑洗脫，洗脫液在45℃水浴加熱條件下用氮氣吹至近干，再用甲醇稀釋并定容，過孔徑為0.45μm的微孔濾膜，濾液作為供試品溶液。

優選的，C₁₈固相萃取柱經再生處理后可以重復使用，所述再生處理方法為：取用過的C₁₈固相萃取柱，先用體積比為80:20的乙腈-四氫呋喃混合溶劑作洗脫劑反復洗滌，再用甲醇與純水交替淋洗。

本發明的有益效果在于：本發明提供了一種檢測果蔬中赤霉素的快速前處理方法，可以加快赤霉素測定的前處理速度，進而全面提高該農藥分析檢測的速度。采用本發明方法，果蔬樣本經過超聲波處理后過C₁₈固相萃取柱，所得供試品溶液可以直接用于高效液相色譜或液相色譜-質譜測定赤霉素含量，樣本前處理時間不超過60分鐘，用時短；而且，C₁₈固相萃取柱經再生處理后可以重復使用2次，回收率保證在80%以上，大大降低了樣本前處理的成本。

具體實施方式