[發明專利]一種由海洋青霉屬真菌大規模制備青霉酸的方法

有效

• 申請號: 201610831163.3
• 申請日: 2016-09-19
• 公開（公告）號: CN107841466B
• 公開（公告）日: 2019-02-22
• 發明（設計）人: 陳敏;沈南星;于躍
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/04;C12R1/80
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.一株海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6，其保藏編號：CGMCC No.12762。

2.權利要求1所述海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6在制備青霉酸中的應用。

3.一種用權利要求1所述海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6制備青霉酸的方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)先在菌種培養基中對權利要求1所述的海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6進行菌種培養；所述菌種培養基中含有葡萄糖0.2％–5.0％、酵母膏0.02％–2％、蛋白胨0.02％–2％、瓊脂0.2％–3.0％、粗海鹽0.05％–5％，適量的水；上述百分比均為重量百分比；培養溫度為15–25℃；培養時間為3–7天；

(2)再在發酵培養基中對步驟(1)中的海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6進行發酵培養；所述發酵培養基中含有葡萄糖0.2％–5.0％、酵母膏0.02％–2％、蛋白胨0.02％–2％、粗海鹽0.05％–5％，適量的水；上述百分比均為重量百分比；培養溫度為15–25℃；培養時間為4–5周；

(3)將步驟(2)得到的發酵物中的發酵液和菌體分離，發酵液用有機溶劑A萃取2～4次，合并萃取液后減壓濃縮得到發酵液浸膏；菌體用有機溶劑B浸提2～4次，合并浸提液后減壓濃縮得到菌體浸膏；合并發酵液浸膏和菌體浸膏，進行色譜分離得粗品；所述的有機溶劑A選自乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿或乙醚中的一種或幾種；所述的有機溶劑B選自甲醇、乙醇、THF或丙酮中的一種或幾種；

(4)步驟(3)得到的粗品經重結晶或色譜分離，得到青霉酸純品。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于所述的重結晶采用水、甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、丙酮、氯仿、戊烷、己烷、乙酸乙酯或石油醚中的一種或幾種作為重結晶溶劑。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于所述的色譜分離是正相硅膠柱色譜分離、反相硅膠柱色譜或凝膠柱色譜分離中的一種或幾種組合。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于所述正相硅膠柱色譜分離中采用的固定相的硅膠目數為100～200目、200～300目或300～400目；流動相為乙酸乙酯/石油醚體積比為1/10～3/5的混合溶劑或者甲醇/二氯甲烷體積比為1/30～1/8的混合溶劑。