[發(fā)明專利]OsMKK6蛋白及編碼基因在調(diào)控植物種子發(fā)育中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610805763.2
• 申請日: 2016-09-06
• 公開（公告）號: CN107805632B
• 公開（公告）日: 2019-08-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高晉蘭;張丹丹;邱金龍
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/82;A01H5/10;A01H6/46
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;張立娜

1.OsMKK6蛋白在調(diào)控植物種子發(fā)育中的應(yīng)用；

所述OsMKK6蛋白為如下a1)或a2)所示的蛋白質(zhì)：

a1)由序列表中序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

a2)在序列表中序列3所示的氨基酸序列中經(jīng)過取代和/或缺失和/或添加一個或幾個氨基酸殘基得到的與植物種子發(fā)育相關(guān)的由a1)衍生的蛋白質(zhì)。

2.OsMKK6蛋白相關(guān)生物材料在調(diào)控植物種子發(fā)育中的應(yīng)用；

所述OsMKK6蛋白為如下a1)或a2)所示的蛋白質(zhì)：

a1)由序列表中序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

a2)在序列表中序列3所示的氨基酸序列中經(jīng)過取代和/或缺失和/或添加一個或幾個氨基酸殘基得到的與植物種子發(fā)育相關(guān)的由a1)衍生的蛋白質(zhì)；

所述OsMKK6蛋白相關(guān)生物材料，為如下b1)-b5)中任一：

b1)編碼所述OsMKK6蛋白的核酸分子；

b2)含有步驟b1)所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉(zhuǎn)基因細胞系；

b3)針對編碼所述OsMKK6蛋白的基因組DNA序列的基因編輯工具；

所述基因編輯工具為序列特異核酸酶，所述序列特異核酸酶能夠特異性剪切所述OsMKK6蛋白的基因組DNA序列中的靶標片段；所述序列特異核酸酶為CRISPR/Cas9核酸酶或轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)因子核酸酶、鋅指核酸酶；

b4)編碼所述基因編輯工具的核酸分子；

b5)含有步驟b4)所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物或轉(zhuǎn)基因細胞系。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：編碼所述OsMKK6蛋白的核酸分子為編碼所述OsMKK6蛋白的DNA分子或RNA分子；所述DNA分子是如下1)至4)中任一所述的DNA分子；所述RNA分子是如下1)至4)中任一所述的DNA分子轉(zhuǎn)錄所得的RNA分子：

1)序列表中序列1所示的DNA分子；

2)序列表中序列2所示的DNA分子；

3)在嚴格條件下與1)或2)所限定的DNA分子雜交且編碼所述OsMKK6蛋白的DNA分子；

4)與1)-3)任一限定的DNA分子具有90％以上同一性且編碼所述OsMKK6蛋白的DNA分子；

或

所述OsMKK6蛋白的基因組DNA序列為序列表中序列1。

4.培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，為如下(A)或(B)：

(A)培育抑制種子發(fā)育的轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括如下步驟：抑制受體植物中OsMKK6蛋白的表達或降低受體植物中OsMKK6蛋白的活性，得到轉(zhuǎn)基因植物；與所述受體植物相比，所述轉(zhuǎn)基因植物的種子發(fā)育受到抑制；

(B)培育促進種子發(fā)育的轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括如下步驟：促進受體植物中OsMKK6蛋白的表達或提高受體植物中OsMKK6蛋白的活性，得到轉(zhuǎn)基因植物；與所述受體植物相比，所述轉(zhuǎn)基因植物的種子發(fā)育受到促進；

所述OsMKK6蛋白為如下(a)或(b)所示的蛋白質(zhì)：

(a)由序列表中序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

(b)在序列表中序列3所示的氨基酸序列中經(jīng)過取代和/或缺失和/或添加一個或幾個氨基酸殘基得到的與植物種子發(fā)育相關(guān)的由(a)衍生的蛋白質(zhì)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述(A)中，所述抑制受體植物中OsMKK6蛋白的表達通過如下實現(xiàn)：采用針對編碼所述OsMKK6蛋白的基因組DNA序列的基因編輯工具對所述受體植物中的所述OsMKK6蛋白的基因組DNA序列進行基因編輯，使得所述受體植物中的所述OsMKK6蛋白的表達受到抑制；所述基因編輯工具為序列特異核酸酶，所述序列特異核酸酶能夠特異性剪切所述OsMKK6蛋白的基因組DNA序列中的靶標片段；所述序列特異核酸酶為CRISPR/Cas9核酸酶、轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)因子核酸酶或鋅指核酸酶。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述OsMKK6蛋白的基因組DNA序列為序列表中序列1。