[發明專利]一種微藻培養方法

有效

• 申請號: 201610791128.3
• 申請日: 2016-08-31
• 公開（公告）號: CN107794225B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 金虎;韓丹翔;李坤朋;張虎;侯國立;徐全;胡強
• 申請（專利權）人: 國投生物科技投資有限公司;中國科學院水生生物研究所
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 北京永新同創知識產權代理有限公司 11376
• 代理人: 欒星明;程大軍

1.一種尖狀柵藻(Scenedesmus acuminatus)異養培養方法，所述方法包括在培養過程中使培養物中碳源濃度的變化幅度小于或等于5g/L，其中所述培養的初始碳源濃度為5-10g/L，

其中在培養過程中通過連續補料的方式添加碳源，所述方式是階段式恒速流加方式，

其中在培養過程中每0.5-3小時測量培養物中的碳源濃度，并根據測得的碳源濃度調整補料速度，從而使碳源濃度的變化幅度小于或等于5g/L，所述補料速度為0.5g/L/h-25g/L/h，

所述尖狀柵藻的初始接種量為5-20％(v/v)，所述尖狀柵藻接種后的初始細胞干重為0.5g/L-5g/L。

2.權利要求1的方法，所述碳源是葡萄糖。

3.權利要求1或2的方法，所述培養在25-40℃下進行。

4.權利要求1或2的方法，所述培養在10-60％的溶氧濃度下進行。

5.權利要求1或2的方法，所述培養過程的碳源濃度被控制在5g/L以下或被控制在5-10g/L。

6.權利要求1或2的方法，所述培養在5-100000L的生物反應器中進行，所述培養物的初始體積為2-40000L。

7.一種異養培養尖狀柵藻(Scenedesmus acuminatus)的方法，所述方法包括以下步驟：

a)將尖狀柵藻接種于固體活化培養基上，在光強30～50μmol m^-2s^-1，25℃±2℃下培養15-20天；

b)挑取步驟a)中獲得的尖狀柵藻至液體一級種子培養基中，在30℃±2℃下以150-220rpm的轉速培養120-144小時或培養至OD₇₅₀＝8-12；

c)將步驟b)中獲得的尖狀柵藻以5-20％(v/v)的接種量接種于液體二級種子培養基中，在30℃±2℃下以150-220rpm的轉速培養72-84小時或培養至OD₇₅₀＝16-20；

d)將步驟c)中獲得的尖狀柵藻以5-20％(v/v)的接種量接種于液體三級種子培養基中，在30℃±2℃下以150-220rpm的轉速培養72-84小時或培養至OD₇₅₀＝20-22；

e)將步驟c)中獲得的尖狀柵藻以5-20％(v/v)的接種量接種于發酵罐中的發酵基礎培養基中，在30℃±2℃下以10-60％的溶氧濃度進行培養，其中所述發酵基礎培養基包含5-10g/L的初始葡萄糖濃度，所述發酵罐的攪拌速度設置為與溶氧濃度偶聯控制；

f)在步驟e)培養期間通過階段式恒速流加方式添加補料培養基，其中

每0.5-3小時測量培養物中的葡萄糖濃度并根據測得的葡萄糖濃度調整補料速度，從而使碳源濃度的變化幅度小于或等于5g/L；和

g)任選地，收獲所培養的尖狀柵藻。