[發明專利]一種固態羅伊氏乳桿菌微生態制劑的制備方法和應用

有效

• 申請號: 201610781611.3
• 申請日: 2016-08-30
• 公開（公告）號: CN107047933B
• 公開（公告）日: 2019-11-12
• 發明（設計）人: 楊家軍;錢坤;吳義景;陳勝;徐曉英;徐雅芫
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/18;A23K40/00;A23K50/30
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 沈尚林

1.一種固態羅伊氏乳桿菌微生態制劑的制備方法，其特征在于，具體步驟如下：

(1)菌種的選擇

選擇羅伊氏乳桿菌在4℃條件下保存備用，所述的羅伊氏乳桿菌的保藏編號為CCTCC M2015660；

(2)MRS培養基的制備

將蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、葡萄糖、吐溫80、磷酸氫二鉀、乙酸鈉、檸檬酸氫二銨、硫酸鎂、硫酸錳、蒸餾水，加熱溶解，調節pH值為6.7，分裝后，121℃高壓蒸汽滅菌20min，備用；

(3)菌種的活化與種子液的獲得

將保存在4℃的羅伊氏乳桿菌接種于MRS培養基上，37℃培養30-36h，如此連續活化3-5次后，再接種于MRS培養基中，37℃培養24h，得到菌種羅伊氏乳桿菌種子液；

(4)固態培養基的制備

將豆粕、豆粉、玉米粉、麩皮、甜菜堿、甘露糖混合均勻得到固態培養基；其中，固態培養基中各原料的重量百分比如下：豆粕：豆粉：玉米粉：麩皮：甜菜堿：甘露糖＝12-18:12-18:7-11:7.5-11.5:0.8-1.2:0.4-0.6；

(5)發酵

將菌種羅伊氏乳桿菌種子液按照5％的接種量接種到固態培養基中，并加入自來水，使得水分含量達50％，攪拌均勻后，放于37℃恒溫箱中，固態發酵24-28小時；

(6)烘干：將固態發酵后的羅伊氏乳桿菌微生態制劑，放入恒溫干燥箱中，干燥溫度為37-45℃，攤開，使厚度不超過6厘米，烘至水份含量達到16-20％，即可裝袋，密封保存。

2.根據權利要求1所述的固態羅伊氏乳桿菌微生態制劑的制備方法，其特征在于：步驟(2)中MRS培養基具體制備方法如下：將10.0g蛋白胨、10.0g牛肉膏、5.0g酵母膏、20.0g葡萄糖、1.0mL吐溫80、2.0g磷酸氫二鉀、5.0g乙酸鈉，2.0g檸檬酸氫二銨、0.58g硫酸鎂、0.25g硫酸錳、1000mL蒸餾水，加熱溶解，調節pH值為6.7，分裝后，121℃高壓蒸汽滅菌20min，備用。

3.一種根據權利要求1-2任意一項所述的固態羅伊氏乳桿菌微生態制劑的制備方法得到的固態羅伊氏乳桿菌微生態制劑的應用，其特征在于：能夠用于豬飼料的添加劑。