[發明專利]用于檢測去勢抵抗性前列腺癌的ELISA試劑盒及使用方法

有效

• 申請號: 201610770859.X
• 申請日: 2016-08-31
• 公開（公告）號: CN106405085B
• 公開（公告）日: 2018-03-27
• 發明（設計）人: 杜娥;劉通;王嘉南;王林;楊闊;馬鵬德;丁浩;陳賽鵬;徐勇
• 申請（專利權）人: 天津市泌尿外科研究所
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 天津市宗欣專利商標代理有限公司12103
• 代理人: 孫喬喬

1.β-actin抗體在制備用于檢測去勢抵抗性前列腺癌的ELISA試劑盒中的用途，其特征在于：所述試劑盒包括β-actin抗體，采用雙抗體夾心ELISA方法檢測血清中β-actin的含量來檢測去勢抵抗性前列腺癌，判定閾值為350.98mg/ml~438.88 mg/ml。

2.根據權利要求1所述的β-actin抗體在制備用于檢測去勢抵抗性前列腺癌的ELISA試劑盒中的用途，其特征在于：所述試劑盒包括包被β-actin抗體的ELISA 酶標板、標準品、標準品&樣品稀釋液、生物素標記的β-actin抗體、親和素標記的辣根過氧化物酶、洗滌液、底物溶液、反應終止液、覆膜中的一種或幾種。

3.根據權利要求1所述的β-actin抗體在制備用于檢測去勢抵抗性前列腺癌的ELISA試劑盒中的用途，其特征在于：所述用于檢測去勢抵抗性前列腺癌的ELISA試劑盒的使用方法，包括以下步驟：

Ⅰ.采集前列腺癌患者全血樣品，離心取上清；

Ⅱ.分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔，空白孔加標準品&樣品稀釋液，余孔分別加標準品或待測樣品，混勻；酶標板加覆膜，孵育；

Ⅲ.棄去孔內液體，甩干；每孔加入生物素標記的β-actin抗體，酶標板加覆膜，溫育；

Ⅳ.棄去孔內液體，甩干，洗滌酶標板，再甩干；

Ⅴ.每孔加入親和素標記的辣根過氧化物酶，酶標板加覆膜，溫育；

Ⅵ. 棄去孔內液體，甩干，洗滌酶標板，再甩干；

Ⅶ.每孔加入底物溶液，酶標板加覆膜，避光孵育；

Ⅷ.每孔加入反應終止液；

Ⅸ. 450nm波長下測量各孔的OD值；

Ⅹ.根據標準品的OD值計算血清樣本β-actin的檢測值，并判斷其與判定閾值的大小關系，所述判定閾值為350.98mg/ml~438.88 mg/ml。

4.根據權利要求3所述的β-actin抗體在制備用于檢測去勢抵抗性前列腺癌的ELISA試劑盒中的用途，其特征在于：所述步驟Ⅰ中全血樣品于室溫放置0~4小時或0~8℃過夜后于500~1500×g離心10~30分鐘。

5.根據權利要求3所述的β-actin抗體在制備用于檢測去勢抵抗性前列腺癌的ELISA試劑盒中的用途，其特征在于：所述步驟Ⅳ中洗滌酶標板1~5次，每次浸泡1-2分鐘；步驟Ⅵ中洗滌酶標板3~7次，每次浸泡1-2分鐘。

6.根據權利要求5所述的β-actin抗體在制備用于檢測去勢抵抗性前列腺癌的ELISA試劑盒中的用途，其特征在于：所述步驟Ⅳ中洗滌酶標板3次，每次浸泡1.5分鐘；步驟Ⅵ中洗滌酶標板5次，每次浸泡1.5分鐘。

7.根據權利要求3所述的β-actin抗體在制備用于檢測去勢抵抗性前列腺癌的ELISA試劑盒中的用途，其特征在于：所述判定閾值為389.98mg/ml。