[發明專利]一種驅油用生物聚合物的制備方法及應用

在審

• 申請號: 201610765724.4
• 申請日: 2016-08-30
• 公開（公告）號: CN107794285A
• 公開（公告）日: 2018-03-13
• 發明（設計）人: 曹嫣鑌;劉濤;李彩風;高光軍;汪剛躍;巴燕;宋欣;胡婧;孫剛正;吳曉玲;趙鳳敏;宋永亭;曹功澤
• 申請（專利權）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司勝利油田分公司石油工程技術研究院
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;E21B43/22;C12R1/01
• 代理公司: 濟南日新專利代理事務所37224
• 代理人: 劉亞寧

1.一種驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的制備方法具體包括以下步驟：

(1)固體培養基單菌落的制備；

(2)茄瓶種子液的制備；

(3)血清瓶種子液的制備；

(4)一級種子液的制備；

(5)二級種子液的制備；

(6)工業級發酵液的制備。

2.根據權利要求1所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的驅油用生物聚合物的菌株為鞘氨醇單胞菌(Sphingomonas sp.)。

3.根據權利要求1或2所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的固體培養基單菌落的制備，其制備方法如下：將保藏的驅油用生物聚合物的菌種接種在斜面培養基上培養，32℃靜置培養15-24h，得到固體培養基單菌落。

4.根據權利要求3所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，斜面培養基配方為：瓊脂粉15-20g/L、酵母粉5-10g/L、蛋白胨2-3g/L、K₂HPO₄2-4g/L、KCl2-5g/L，調pH值為7-8。

5.根據權利要求1所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的茄瓶種子液的制備，其制備方法如下：在無菌操作條件下刮取上述固體培養基單菌落于含有5-8mL無菌水的試管里，用無菌移液管吹吸使菌體分散均勻，并均勻涂布在茄瓶斜面培養基上；接種好的茄瓶以10-20°角度傾斜靜置于恒溫培養箱內，32℃恒溫培養48～72h，得到茄瓶種子液。

6.根據權利要求5所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，茄瓶斜面培養基配方為：葡萄糖5-10g/L、牛肉膏3-6g/L、蛋白胨5-10g/L、NaCl3-5g/L、瓊脂10-20g/L，調pH值7-8，115℃滅菌30min。

7.根據權利要求1所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的血清瓶種子液的制備，其液制備方法如下：刮取茄瓶種子液于100mL無菌水中，在火焰保護下無菌操作將上述帶有菌種的無菌水接入裝有培養基的血清瓶中進行培養，血清瓶體積為3-5L，培養基裝入量1.5-3L，培養條件為32℃，搖床震蕩培養10-15h，搖床轉速120-160轉/分，得到血清瓶種子液。

8.根據權利要求7所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，血清瓶培養基配方為：蔗糖10-20g/L、酵母膏0.5-1g/L、K₂HPO₄·3H₂O1-2g/L、MgSO₄·7H₂O0.1-0.3g/L，調pH值7.5±0.2，121℃滅菌30-40min。

9.根據權利要求1所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的一級種子液的制備，其制備方法如下：選擇體積為800-1000L的一級種子罐設備1個，往一級種子罐內裝入500-700L已經滅菌的一級培養基，然后將制備好的血清瓶種子液在火焰保護下通過無菌接種設備轉入到一級種子罐內，進行發酵培養，培養條件為：培養溫度32±0.5℃，通風量10-20m³/h，罐壓0.05～0.1MPa，培養時間10～15h，得到一級種子液。

10.根據權利要求9所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，一級培養基配方為：蔗糖10-20g/L、酵母膏0.5-1g/L、K₂HPO₄·3H₂O2-3g/L、MgSO₄·7H₂O0.1-0.3g/L，調pH值7-8，121℃滅菌30-40min。

11.根據權利要求1所述的驅油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的二級種子液的制備，其制備方法如下：選擇體積為8-10噸的二級種子罐1個，往二級種子罐內裝入5-6噸已經滅菌的二級培養基，然后將制備好的一級種子液在火焰保護下通過無菌接種設備轉入到二級種子罐內，進行發酵培養，培養條件為：培養溫度32±0.5℃、通氣量100-200m³/h、罐壓0.08～0.1MPa，培養時間10-15h，得到二級種子液。