[發(fā)明專利]一種驅(qū)油用生物聚合物的制備方法及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610765724.4
• 申請(qǐng)日: 2016-08-30
• 公開（公告）號(hào): CN107794285A
• 公開（公告）日: 2018-03-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹嫣鑌;劉濤;李彩風(fēng);高光軍;汪剛躍;巴燕;宋欣;胡婧;孫剛正;吳曉玲;趙鳳敏;宋永亭;曹功澤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司勝利油田分公司石油工程技術(shù)研究院
• 主分類號(hào): C12P19/04
• 分類號(hào): C12P19/04;E21B43/22;C12R1/01
• 代理公司: 濟(jì)南日新專利代理事務(wù)所37224
• 代理人: 劉亞寧

1.一種驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的制備方法具體包括以下步驟：

(1)固體培養(yǎng)基單菌落的制備；

(2)茄瓶種子液的制備；

(3)血清瓶種子液的制備；

(4)一級(jí)種子液的制備；

(5)二級(jí)種子液的制備；

(6)工業(yè)級(jí)發(fā)酵液的制備。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的驅(qū)油用生物聚合物的菌株為鞘氨醇單胞菌(Sphingomonas sp.)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的固體培養(yǎng)基單菌落的制備，其制備方法如下：將保藏的驅(qū)油用生物聚合物的菌種接種在斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，32℃靜置培養(yǎng)15-24h，得到固體培養(yǎng)基單菌落。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，斜面培養(yǎng)基配方為：瓊脂粉15-20g/L、酵母粉5-10g/L、蛋白胨2-3g/L、K₂HPO₄2-4g/L、KCl2-5g/L，調(diào)pH值為7-8。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的茄瓶種子液的制備，其制備方法如下：在無菌操作條件下刮取上述固體培養(yǎng)基單菌落于含有5-8mL無菌水的試管里，用無菌移液管吹吸使菌體分散均勻，并均勻涂布在茄瓶斜面培養(yǎng)基上；接種好的茄瓶以10-20°角度傾斜靜置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，32℃恒溫培養(yǎng)48～72h，得到茄瓶種子液。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，茄瓶斜面培養(yǎng)基配方為：葡萄糖5-10g/L、牛肉膏3-6g/L、蛋白胨5-10g/L、NaCl3-5g/L、瓊脂10-20g/L，調(diào)pH值7-8，115℃滅菌30min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的血清瓶種子液的制備，其液制備方法如下：刮取茄瓶種子液于100mL無菌水中，在火焰保護(hù)下無菌操作將上述帶有菌種的無菌水接入裝有培養(yǎng)基的血清瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，血清瓶體積為3-5L，培養(yǎng)基裝入量1.5-3L，培養(yǎng)條件為32℃，搖床震蕩培養(yǎng)10-15h，搖床轉(zhuǎn)速120-160轉(zhuǎn)/分，得到血清瓶種子液。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，血清瓶培養(yǎng)基配方為：蔗糖10-20g/L、酵母膏0.5-1g/L、K₂HPO₄·3H₂O1-2g/L、MgSO₄·7H₂O0.1-0.3g/L，調(diào)pH值7.5±0.2，121℃滅菌30-40min。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的一級(jí)種子液的制備，其制備方法如下：選擇體積為800-1000L的一級(jí)種子罐設(shè)備1個(gè)，往一級(jí)種子罐內(nèi)裝入500-700L已經(jīng)滅菌的一級(jí)培養(yǎng)基，然后將制備好的血清瓶種子液在火焰保護(hù)下通過無菌接種設(shè)備轉(zhuǎn)入到一級(jí)種子罐內(nèi)，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度32±0.5℃，通風(fēng)量10-20m³/h，罐壓0.05～0.1MPa，培養(yǎng)時(shí)間10～15h，得到一級(jí)種子液。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，一級(jí)培養(yǎng)基配方為：蔗糖10-20g/L、酵母膏0.5-1g/L、K₂HPO₄·3H₂O2-3g/L、MgSO₄·7H₂O0.1-0.3g/L，調(diào)pH值7-8，121℃滅菌30-40min。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的驅(qū)油用生物聚合物的制備方法，其特征在于，所述的二級(jí)種子液的制備，其制備方法如下：選擇體積為8-10噸的二級(jí)種子罐1個(gè)，往二級(jí)種子罐內(nèi)裝入5-6噸已經(jīng)滅菌的二級(jí)培養(yǎng)基，然后將制備好的一級(jí)種子液在火焰保護(hù)下通過無菌接種設(shè)備轉(zhuǎn)入到二級(jí)種子罐內(nèi)，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度32±0.5℃、通氣量100-200m³/h、罐壓0.08～0.1MPa，培養(yǎng)時(shí)間10-15h，得到二級(jí)種子液。