[發明專利]水解羥基積雪草苷制備羥基積雪草酸的方法

有效

• 申請號: 201610728601.3
• 申請日: 2016-08-25
• 公開（公告）號: CN106366153B
• 公開（公告）日: 2018-01-26
• 發明（設計）人: 黃健軍;謝冬養;陸美珍;葉出良
• 申請（專利權）人: 桂林益天成生物科技有限公司
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司45107
• 代理人: 周兆陽

技術領域

本發明屬于生物提取技術領域，具體涉及一種水解羥基積雪草苷制備羥基積雪草酸的方法。

背景技術

積雪草(Centella asiatica(L.)Urban)為傘形科積雪草樹植物，因其葉子酷似馬蹄狀或半個銅錢，所以又名馬蹄草、連錢草等，民間也有地方稱其為胡薄荷、地錢草等。積雪草在許多國家和地區的傳統醫藥領域中的應用歷史悠久，我國中醫中藥對積雪草的內服和外用已有兩千年歷史，最早被《神農本草經》一書所收載。據《本草綱目》記載，積雪草味苦、辛，性寒，無毒，歸肝、脾、腎、胃經，其功效為活血、消腫止痛，并有清熱解毒、利尿等。積雪草的化學成分主要有三萜類、黃酮類、多炔烯類和揮發油類等。三萜類主要有三萜皂苷類，如積雪草苷、羥基積雪草苷等，和三萜酸類，如積雪草酸、羥基積雪草酸等。一般認為，積雪草中起活性作用的主要是積雪草苷和羥基積雪草苷等三萜皂苷類物質，但近年來也有資料研究表明，生物體內積雪草酸、羥基積雪草酸等苷元的生物利用度明顯較其相應的苷類要高。研究表明，羥基積雪草苷在十二指腸和結腸吸收差，在空腸和回腸段吸收略有提高，羥基積雪草苷在大腸部分轉化為苷元后吸收則顯著增加，而羥基積雪草苷元可以直接被吸收進入動物血液中，皂苷則需要現在體內水解成苷元才能被吸收利用。

近年來的研究表明，積雪草酸和羥基積雪草酸在抗氧化、抗癌等方面具有一定的作用，而且對于腦缺血也有部分療效。羥基積雪草酸等苷元在積雪草中的含量比羥基積雪草苷低得多，積雪草中皂苷含量一般為1.8～5％，而皂苷元同皂苷的含量比通常為1：2.5，因此通過積雪草皂苷水解來獲得積雪草皂苷元是一條有效的途徑。常規水解羥基積雪草皂苷制備羥基積雪草酸的方法為：將羥基積雪草苷溶于乙醇溶液中，加入1mol/L的NaOH溶液作為催化劑，在80℃下水解2～10h，水解結束后，冷卻水解液，調PH值至2，靜置沉淀，過濾收集沉淀，將沉淀物溶于乙醇，再加水進行結晶，過濾，即為乳白色結晶。上述方法采用高溫水解，會造成羥基積雪草酸發生脫水、環合、雙鍵位移、取代基位移、構型轉化等變化，大大降低目標成分的收率和純度。

發明內容

本發明解決的技術問題是提供一種水解羥基積雪草苷制備羥基積雪草酸的方法，該方法在常溫常壓下即可快速斷開糖苷鍵，水解過程溫和，水解徹底，且不會產生羥基積雪草酸的構型變化。

本發明提供的技術方案是提供一種水解羥基積雪草苷制備羥基積雪草酸的方法，包括以下步驟：

1)將羥基積雪草苷、十二烷基硫酸鈉和NaOH混合，加水溶解，在常溫下水解10～15min；

2)調節水解液pH值至2～5，靜置，過濾，收集沉淀；

3)將沉淀溶于乙醇中，過濾，將濾液加水進行結晶，過濾，得到結晶，烘干，即得羥基積雪草酸。

步驟1)中，十二烷基硫酸鈉在混合溶液中的濃度3.44～4.3×10^-2mol/L。由于十二烷基硫酸鈉的臨界膠團濃度為0.86×10^-2mol/L，當表面活性劑分子的濃度高于其臨界膠團濃度時，表面活性劑分子就會在溶液內部形成大量膠團，又由于十二烷基硫酸鈉在水中濃度大于臨界膠團濃度時，極易形成熱力學穩定形狀即棒狀膠團，當十二烷基硫酸鈉的濃度繼續提高至臨界膠團濃度的4～5倍時，即3.44～4.3×10^-2mol/L時，棒狀膠團在水溶液中相互蠕動，進而形成層狀膠團結構，可大大提高對疏水基團的包裹作用。

羥基積雪草苷為兩性物質，是由羥基積雪草酸與葡萄糖和鼠李糖通過糖苷鍵結合的物質，葡萄糖和鼠李糖為親水基團，而羥基積雪草酸為疏水基團，親水基團部分存在膠束團表面，而疏水基團則穿插在形成棒狀膠束的表面活性劑分子間，由于層狀膠團的存在，疏水基團則被完全插入在層狀膠團中間，此時，親水基團露在表面，十分有利于OH^-快速且全面進攻糖苷鍵，使得糖苷鍵發生消除反應而開裂苷鍵，水解快速且徹底。因此，NaOH在混合溶液中的濃度為0.01～0.02mol/L即可水解完全，水解時間僅需10～15min。

步驟2)中，采用HCl調節pH值。

步驟3)中，所述沉淀與乙醇的料液比為1g：5～30ml。所述乙醇的體積濃度為50～70％。

步驟3)中，水的用量為乙醇體積的8～16倍。

與現有技術相比，本發明可在常溫常壓下即可快速斷開糖苷鍵，水解過程溫和，水解徹底，且不會產生羥基積雪草酸的構型變化。

具體實施方式

以下具體實施例對本發明作進一步闡述，但不作為對本發明的限定。