[發(fā)明專利]從油橄欖果渣中提取分離齊墩果酸的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610726918.3
• 申請(qǐng)日: 2016-08-25
• 公開（公告）號(hào): CN106349321B
• 公開（公告）日: 2018-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝冬養(yǎng);黃健軍;陸美珍;葉出良
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 桂林益天成生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07J63/00
• 分類號(hào): C07J63/00
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司45107
• 代理人: 周兆陽(yáng)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從油橄欖果渣中提取分離齊墩果酸的方法。

背景技術(shù)

油橄欖(Olea europare L.)是世界著名的木本油料樹種，有4000多年的栽培歷史。油橄欖果經(jīng)壓榨后產(chǎn)生大量的果渣，大部分直接被廢棄，不僅嚴(yán)重污染環(huán)境，也造成了資源的浪費(fèi)。油橄欖果渣由油橄欖果皮、果核及殘余果肉組成，其中主要含有三萜類、黃酮類、揮發(fā)油、維生素等有效成分。三萜類化合物主要是由6個(gè)異戊二烯結(jié)構(gòu)單元構(gòu)成，大部分為含30個(gè)碳原子的萜類化合物。油橄欖果渣三萜類成分主要包括齊墩果酸、山楂酸和熊果酸，而這三種物質(zhì)結(jié)構(gòu)相似，通常采用柱色譜技術(shù)將其進(jìn)行分離，但反復(fù)硅膠柱色譜分離和重結(jié)晶導(dǎo)致最終得到的樣品量很少。又由于柱色譜技術(shù)普遍存在處理周期長(zhǎng)，連續(xù)操作性不強(qiáng)，不易作為分離介質(zhì)用于生物活性物質(zhì)的工業(yè)生產(chǎn)進(jìn)程。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種從油橄欖果渣中提取齊墩果酸的方法，該方法簡(jiǎn)單，周期短，得到的齊墩果酸純度高，收率大。

本發(fā)明提供的技術(shù)方案是從油橄欖果渣中提取齊墩果酸的方法，包括以下步驟：

1)將油橄欖果渣用體積濃度為70～90％的乙醇溶液提取，將提取液過(guò)濾，取濾液減壓回收乙醇，得到粗提物；

2)將粗提物加入體積濃度為50～65％乙醇溶液重新溶解，得到混合溶液；

3)將混合溶液上AB-8大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫至無(wú)色，然后采用40～50℃、0.1～0.15mol/L的碳酸氫鈉溶液進(jìn)行洗脫，再用68～72℃、1～1.5mol/L的碳酸氫鈉溶液進(jìn)行洗脫，收集第三次洗脫液，調(diào)節(jié)pH至3～5，過(guò)濾，取濾渣干燥，即得。

在步驟1)中，采用體積濃度為70～90％的乙醇溶液提取油橄欖果渣，可充分提取油橄欖果渣中的齊墩果酸、山楂酸以及熊果酸。油橄欖果渣與乙醇溶液的料液比為1g：10～20ml。所述提取為加熱回流提取，提取次數(shù)為1～3次，每次提取時(shí)間為1～3h。

步驟2)中，采用體積濃度為50～65％的乙醇溶液溶解粗提物，可去除粗提物中極性較小的雜質(zhì)，起到初步純化的效果。加入乙醇溶液至粗提物濃度為0.06～0.10g/ml，此時(shí)上柱的吸附效果最佳。

步驟3)中，AB-8型號(hào)的大孔樹脂為弱極性，平均孔徑為13～14nm，比表面積為480～520m²/g。由于齊墩果酸、山楂酸、熊果酸均為弱極性物質(zhì)，且具有一定的疏水性，生成氫鍵的能力較弱，因而易被非極性及弱極性樹脂所吸附。其次，大孔吸附樹脂吸附物質(zhì)時(shí)，被吸附組分是通過(guò)樹脂的孔徑擴(kuò)散到樹脂孔內(nèi)表面而被吸附，當(dāng)樹脂孔徑小于吸附的有效成分分子時(shí)，有效成分分子不能進(jìn)入樹脂內(nèi)部，只能吸附在樹脂外表面，當(dāng)樹脂孔徑大于有效成分分子時(shí)，有效成分既能吸附在樹脂外表面也可吸附在內(nèi)表面，對(duì)山楂酸、齊墩果酸以及熊果酸來(lái)說(shuō)，其分子量分別為472、456和456，因此采用AB-8大孔樹脂的吸附效果較好。樹脂柱的徑高比為1:3～6為宜，以1:4最佳。

齊墩果酸、山楂酸和熊果酸結(jié)構(gòu)極為相似，其中熊果酸和齊墩果酸更是同分異構(gòu)體，普通的柱色譜很難將其分離開來(lái)，但是本發(fā)明采用40～50℃、0.1～0.15mol/L的碳酸氫鈉溶液可以與樹脂中極性較大的山楂酸反應(yīng)生成可溶性鈉鹽，進(jìn)而洗脫下來(lái)，而極性偏小的齊墩果酸和熊果酸的羧基和水分子的極化能力較差，不能電離出H+，無(wú)法與碳酸氫鈉進(jìn)行反應(yīng)生成鈉鹽，則留在樹脂柱中。碳酸氫鈉溶液的洗脫速度為1～1.5BV/h，其用量為1～1.5BV時(shí)，洗脫效果較好。

采用68～72℃、1～1.5mol/L的碳酸氫鈉溶液進(jìn)行洗脫，此時(shí)可以洗脫齊墩果酸，而熊果酸不被洗脫，由于齊墩果酸和熊果酸結(jié)構(gòu)為同分異構(gòu)體，因此，采用較快的洗脫速度2～2.5BV/h，較小的洗脫劑量為0.5～1BV，可最大程度洗脫齊墩果酸，而熊果酸不被洗脫。

本發(fā)明的方法簡(jiǎn)單、周期短，提取的齊墩果酸純度高，收率大。

具體實(shí)施方式

以下具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但不作為對(duì)本發(fā)明的限定。

實(shí)施例1

1)將油橄欖果渣與體積濃度為70％的乙醇溶液按料液比為1g：10ml的比例混合，加熱回流提取3h，將提取液過(guò)濾，取濾液減壓回收乙醇，得到粗提物；

2)將粗提物加入體積濃度為50％乙醇溶液至粗提物濃度為0.06g/ml，攪勻，得到混合溶液；