[發明專利]結直腸癌microRNA分子標志物及其用途

有效

• 申請號: 201610720090.0
• 申請日: 2016-08-24
• 公開（公告）號: CN107779504B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 賈寶慶;劉洪一;張衛紅;李冰;靳文靜;李鵬;宋高尚;郭少華;劉欣欣
• 申請（專利權）人: 北京曠博生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/113
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 顧小曼;王磊

1.一種結直腸癌microRNA分子標志物組合，其由以下的microRNA核酸分子構成：序列為SEQ ID NO:1的miR-21-3p、序列為SEQ ID NO:2的miR-877-5p、序列為SEQ ID NO:3的miR-181d、序列為SEQ ID NO:4的miR-202-3p、序列為SEQ ID NO:5的miR-19b-3p 、序列為SEQ ID NO:6的miR-380-5p 、序列為SEQ ID NO:7的miR-1246、序列為SEQ ID NO:8的miR-627、序列為SEQ ID NO:9的miR-451a、序列為SEQ ID NO:10的miR-339-5p、序列為SEQ IDNO:11的miR-520e、序列為SEQ ID NO:12的miR-21-5p和序列為SEQ ID NO:13的miR-532-3p。

2.權利要求1所述的結直腸癌microRNA分子標志物組合在制備結直腸癌診斷試劑中的用途。

3.權利要求2所述的用途，其中，所述診斷試劑通過檢測被試者血漿或血清中所述的結直腸癌microRNA分子標志物的含量，并與結直腸息肉患者或健康對照平均水平相比較來判斷是否發生結直腸癌。

4.權利要求2或3所述的用途，其中，使用定量PCR的方法來檢測被試者血漿或血清中所述的結直腸癌microRNA分子標志物含量。

5.一種結直腸癌診斷和療效及預后評估試劑盒，其特征在于：包括引物，所述引物為權利要求1所述的結直腸癌microRNA分子標志物組合的特異性正向引物。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于所述的特異性正向引物由以下序列的引物構成：序列為SEQ ID NO:19的miR-21-3p的引物、序列為SEQ ID NO:20的miR-877-5p的引物、序列為SEQ ID NO:21的miR-181d的引物、序列為SEQ ID NO:22的miR-202-3p的引物、序列為SEQ ID NO:23的miR-19b-3p的引物、序列為SEQ ID NO:24的miR-380-5p的引物、序列為SEQ ID NO:25的miR-1246的引物、序列為SEQ ID NO:26的miR-627的引物、序列為SEQ IDNO:27的miR-451a的引物、序列為SEQ ID NO:28的miR-339-5p的引物、序列為SEQ ID NO:29的miR-520e的引物、序列為SEQ ID NO:30的miR-21-5p的引物和序列為SEQ ID NO:31的miR-532-3p的引物。

7.根據權利要求6所述的試劑盒，其還進一步包括：

（1）血漿/血清總RNA提取試劑，

（2）RNA加polyA試劑，

（3）RT-PCR試劑，

（4）定量PCR試劑，

其中，定量PCR試劑中包括權利要求6中所述的結直腸癌microRNA分子標志物組合的特異性正向引物。

8.權利要求7所述的試劑盒，其中，所述血漿/血清總RNA提取試劑中包括序列為SEQ IDNO:14的外部控制序列-1，其中，所述RNA加polyA試劑中包括序列為SEQ ID NO:15的外部控制序列-2，其中，所述RT-PCR試劑中包括序列為SEQ ID NO:16的反轉錄引物。

9.權利要求7所述的試劑盒，其中，所述定量PCR試劑中包括序列分別為SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18的通用反向引物UPM-short和UPM-long。