[發明專利]一種確定芪白平肺顆粒指紋圖譜的方法及其指紋圖譜

有效

• 申請號: 201610715085.0
• 申請日: 2016-08-24
• 公開（公告）號: CN107782833B
• 公開（公告）日: 2019-11-12
• 發明（設計）人: 蕭偉;付娟;張海弢;李家春;王偉;胡軍華;黃文哲;王振中
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 北京律和信知識產權代理事務所(普通合伙) 11446
• 代理人: 武玉琴;劉國偉

1.一種確定芪白平肺顆粒指紋圖譜的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟，

步驟1：用甲醇溶液分別對芪白平肺顆粒樣品和五味子醇甲進行提取，得到樣品溶液和參照物溶液；

步驟2：對樣品溶液和參照物溶液進行高效液相色譜分析；分別精密吸取樣品溶液與參照物溶液各10μl，注入液相色譜儀測定，記錄100min指紋圖譜；

高效液相色譜條件如下：

色譜柱：選自規格為4.6×250mm、5μm的Waters XBridge C18，規格為4.6×250mm、5μm的Phenomenex Luna C18和規格為4.6×250mm、5μm的Kromasil C18中的任一種；

以甲醇為流動相A，以0.2％甲酸為流動相B，按如下條件進行梯度洗脫：時間0～100分鐘，流動相A(％)5→95，流動相B(％)95→5；

理論板數按五味子醇甲峰計算不低于6000；

流速為0.8ml/min～1.2ml/min；

柱溫為25℃～35℃；

檢測波長為250nm。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，

在步驟1中，樣品溶液制備具體過程：將芪白平肺顆粒研細，取本品適量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入50％甲醇超聲提取或回流提取30min，放冷，搖勻，離心，取上清液，即得；

參照物溶液制備具體過程：精密稱定五味子醇甲，加50％甲醇制成五味子醇甲溶液。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述步驟一選擇用超聲提取，提取溶劑體積為芪白平肺顆粒取樣量12.5倍的50％甲醇；所述五味子醇甲溶液濃度為95.61μg·mL^-1。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜條件中，流速選為1.0ml/min，柱溫選為30℃。

5.根據權利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，得到的所述指紋圖譜包括1-25號峰，其中，12號峰為咖啡酸，13號峰為阿魏酸，22號峰為五味子醇甲作為參照峰，23號峰為五味子酯甲，24號峰為五味子甲素，25號峰為五味子乙素，其相對保留時間分別為0.355～0.44、0.49～0.60、1.00、1.05～1.3、1.12～1.4、1.15～1.48。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述咖啡酸、阿魏酸、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的相對峰面積分別為3.293～4.025、1.977～2.416、1.00、0.343～0.419、0.870～1.064、0.367～0.449。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，在所述指紋圖譜中，1號峰、2號峰、3號峰、4號峰、5號峰、6號峰、7號峰、8號峰、9號峰、10號峰、11號峰、14號峰、15號峰、16號峰、17號峰、18號峰、19號峰、20號峰、21號峰，其相對保留時間分別為0.065～0.085、0.075～0.100、0.085～0.11、0.10～0.125、0.105～0.135、0.145～0.185、0.115～0.245、0.205～0.255、0.220～0.275、0.268～0.335、0.325～0.40、0.495～0.610、0.565～0.695、0.595～0.735、0.615～0.755、0.640～0.785、0.715～0.88、0.735～0.905、0.85～1.05。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述1號峰、2號峰、3號峰、4號峰、5號峰、6號峰、7號峰、8號峰、9號峰、10號峰、11號峰、14號峰、15號峰、16號峰、17號峰、18號峰、19號峰、20號峰、21號峰，其相對峰面積分別為0.339～0.414、1.028～1.256、1.522～1.860、2.141～2.617、3.462～4.231、0.784～0.958、0.558～0.682、0.511～0.625、0.339～0.415、0.862～1.054、0.831～1.016、1.514～1.851、0.242～0.295、0.696～0.850、0.647～0.790、0.453～0.554、0.925～1.131、0.207～0.253、0.628～0.767。