[發明專利]一種飛行時間質譜系統微生物樣本前處理的試劑盒有效
| 申請號: | 201610696197.6 | 申請日: | 2016-08-20 |
| 公開(公告)號: | CN107024370B | 公開(公告)日: | 2018-07-27 |
| 發明(設計)人: | 馬慶偉;馮立平;王杰;游勝群 | 申請(專利權)人: | 北京毅新博創生物科技有限公司 |
| 主分類號: | G01N1/28 | 分類號: | G01N1/28;G01N27/64 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 102206 北京市*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 飛行 時間 譜系 微生物 樣本 處理 試劑盒 | ||
1.一種通過用于飛行時間質譜微生物樣本前處理的試劑組合物來檢測微生物的方法,該試劑組合物包括組分I和組分II,并且該方法包括如下步驟:
(1)在合適的培養基中分離待鑒定的微生物,獲得單菌落;
(2)用滅菌牙簽或者1μl接種環挑取部分合適的單菌落于裝有10μl組分I的離心管中,進行細胞破碎,蛋白及多肽釋放,裂解5分鐘,其中組分I包括50.0%(v/v)的乙腈、35.0%(v/v)的甲酸,余量為水;
(3)取上述溶液1μl加到靶板的孔位上,室溫干燥;
(4)打開組分II的微管,移取1μl組分II加到同一孔位上,室溫干燥,其中組分II包括52.5%(v/v)的乙腈、2.5%(v/v)的三氟乙酸、15mg/ml(m/v)α‐氰基‐4‐羥基肉桂酸,余量為水;
(5)靶板放入飛行時間質譜系統中進行檢測;
其中,該組合物可將理論上落入可信區間的鑒定分數,實際上落入不可信區間、原來需要二次鑒定的不可信結果提高到可信區間,從而避免了假陰性的可能,其中可信區間即判斷標準III:1.700‐1.999分,不可信區間即判斷標準IV:0.000‐1.699分,以及,
所述微生物是環境污染中的微生物、食品檢疫中的微生物、進出口商品中的微生物、藥物研究中耐藥性微生物。
2.權利要求1的方法,其中所述微生物檢測是確定微生物的屬、種、亞種或亞型。
3.權利要求1或2的方法,其中所述微生物是原核微生物、真核微生物。
4.權利要求3的方法,其中所述原核微生物包括細菌,所述真核微生物為真菌。
5.權利要求4的方法,其中所述真菌包括酵母菌、霉菌。
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