[發明專利]保存和運輸循環核酸樣本的真空血液采集管

在審

• 申請號: 201610694489.6
• 申請日: 2016-08-19
• 公開（公告）號: CN107760593A
• 公開（公告）日: 2018-03-06
• 發明（設計）人: 付士明
• 申請（專利權）人: 付士明
• 主分類號: C12M1/26
• 分類號: C12M1/26;C12N15/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明是一種真空血液采集管，特別是一種保存和運輸循環核酸樣本的真空血液采集管。

背景技術

循環核酸是一種存在于全血血漿和血清中的核酸，循環核酸也叫胞外核酸，循環核酸可通過對血液的采集來獲取，所以如何保存和運輸含有循環核酸的樣本，是很現實的技術問題，為此人們開發了用于保存和運輸循環核酸樣本的采集管，但目前的用于保存和運輸循環核酸樣本的采集管或相應的真空采血管，存在著明顯缺陷，主要表現在采集管中所添加的保存液，基本上是甲醛釋放劑類的保存液，如烷基脲類，由于該保存液會出現蛋白與核酸交聯、蛋白與蛋白交聯及核酸與核酸交聯的問題，所以致使循環核酸提取量很低，無法滿足臨床需要，尤其是腫瘤循環核酸（包括DNA和RNA），其含量本身就很低，導致提取量更低，所以無法提取到足夠的腫瘤循環核酸；另外，甲醛對循環核酸有一定的降解作用，就更進一步降低了循環核酸的提取量。。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術導致循環核酸提取量偏低的缺陷，發明一種在常溫下不影響后續QPCR實驗的保存和運輸循環核酸樣本的真空血液采集管。

本發明是按照下面的方式來實現的：所述保存和運輸循環核酸樣本的真空血液采集管，由原管、膠塞和保護帽構成，原管被抽成真空，膠塞密封于原管上，其特征在于：原管內設有復合添加劑，復合添加劑由螯合劑、酶抑制劑、滲透壓劑、抗氧劑、細胞凋亡抑制劑、細胞膜穩定劑、緩沖液混合而成。

所述原管內設有托架，托架上設有內管，內管的底部設有與原管相通的通道，內管內設有過濾芯，過濾芯之上方的內管6的管壁上噴涂有抗凝劑或促凝劑的載藥層，復合添加劑位于原管的底部，膠塞壓在內管的管口上，使原管和內管同時被密封。

所述原管內設有托架，托架上設有內管，內管的底部設有與原管相通的通道，內管內設有過濾芯，過濾芯之上設有涂有抗凝劑或促凝劑的載藥片，復合添加劑位于原管的底部，膠塞壓在內管的管口上，使原管和內管同時被密封。

所述過濾芯由非織造布折疊而成的過濾材料和孔隙塑料組成。

所述原管用PET材料制作；膠塞用丁基橡膠制作；內管用PP、PET塑料材料制作。

所述復合添加劑按重量份的配比如下：

螯合劑0.1-40；優選1-15；

酶抑制劑0.001-20；優選0.01-10；

滲透壓劑0.1-10；優選0.5-5；

抗氧劑0.01-10；優選0.1-5；

細胞凋亡抑制劑0.01-50；優選0.05-30；

細胞膜穩定劑0.1-10；優選0.5-5；

緩沖液30-90；優選35-80；

配制時，首先在燒杯中加入緩沖液，然后按所述重量份將其余添加劑稱重加入緩沖液，再用磁力攪拌器混合攪拌，最后裝入試劑瓶密封保存即可。

所述螯合劑包括EGTA、EDTA鹽、檸檬酸鹽、水蛭素、草酸鹽的一種或他們的組合；

酶抑制劑包含羥甲基甘氨酸鈉、焦碳酸二乙酯（DEPC）、氟化鈉、抑肽酶、氧釩核糖核苷復合物、Rnasin Inhibitor、異硫氰酸胍、SDS、尿素、硅藻土、苯甲基磺酰氟（PMSF）、EGTA、EDTA鹽、檸檬酸鹽、ATA、亮肽素、胰蛋白酶抑制劑、半胱氨酸蛋白酶抑制劑、原釩酸鈉、胃蛋白酶抑制劑的一種或它們的組合；

滲透壓劑包括NaCL、蔗糖、海藻糖、二羥基丙酮、果糖、N,N- 二甲基乙酰胺、N,N- 二乙基乙酰胺、N,N- 二甲基甲酰胺、N,N- 二乙基甲酰胺；N,N- 二甲基丙酰胺、山梨糖醇、硫酸銨、醋酸銨、甘露醇、二甲基亞砜、甘油、甲酰胺的一種或它們的組合；

抗氧劑包括β-巰基乙醇、亞硫酸鈉、亞硫酸銨、二硫赤蘚糖醇、色甘酸二鈉、腺苷、卵磷脂、二硫蘇糖醇、半胱氨酸、亞硫酸鈉的一種或它們的組合；

細胞凋亡抑制劑包括茶堿、PEG、半胱天冬酶抑制劑Q-VD-Oph，Z-Val-Ala-Asp（Ome）FMK）、褪黑素、甘油醛、腐胺、多胺的一種或它們的組合；

細胞膜穩定劑包含蔗糖、葡萄糖、腺苷、甘氨酸、?-環糊精、高錳酸鹽、重鉻酸鹽、高氯酸鹽、碘酸鹽、表面活性劑的一種或它們的組合；

緩沖液包含檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液、檸檬酸-氫氧化鈉-鹽酸緩沖液、磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液、醋酸-醋酸鈉緩沖液、磷酸鹽緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、巴比妥納-鹽酸緩沖液、Tris-HCl緩沖液、硼酸-硼砂緩沖液、鄰苯二甲酸-鹽酸緩沖液、甘氨酸-鹽酸緩沖液、碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液的一種。