[發明專利]一種硫酸多粘菌素B結晶及其制備方法

在審

• 申請號: 201610694064.5
• 申請日: 2016-08-19
• 公開（公告）號: CN107759669A
• 公開（公告）日: 2018-03-06
• 發明（設計）人: 王增霞;李小兵;羅汾;李長洪;許彥偉;陳龍
• 申請（專利權）人: 湖北瑞昊安科醫藥科技發展有限公司
• 主分類號: C07K7/62
• 分類號: C07K7/62;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22;C07K1/18;C07K1/107;A61K38/12;A61P31/04
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司11280
• 代理人: 李渤,郭廣迅

1.一種硫酸多粘菌素B結晶的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

1)用樹脂對多粘菌素B發酵液進行吸附，加入硫酸水溶液和/或酸性乙醇水溶液進行解吸，得到解吸液；

2)將步驟1)得到的解吸液的pH調節至5.0～7.0，然后濃縮至有固體析出，得到硫酸多粘菌素B飽和溶液；

3)在攪拌下，將有機溶劑滴入步驟2)得到的硫酸多粘菌素B飽和溶液中或者將步驟2)得到的硫酸多粘菌素B飽和溶液滴入有機溶劑中，以析出晶體，過濾，將濾餅干燥，得到硫酸多粘菌素B結晶。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟1)中，所述硫酸水溶液的濃度為0.2mol/L。

3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法還包括在步驟1)中，在用樹脂對多粘菌素B發酵液進行吸附前，所述多粘菌素B發酵液還經過預處理，所述預處理包括以下步驟：

a)酸化處理；

b)加硅藻土過濾；

優選地，所述用樹脂對多粘菌素B發酵液進行吸附包括：

(i)離子交換處理；

(ii)大孔吸附樹脂處理；

更優選地，所述預處理包括將所述多粘菌素B發酵液的pH調節至1.8，然后在步驟b)加入硅藻土，攪拌均勻后過濾，再以水頂洗至濾液效價小于0.2g/L；再優選地，所述pH調節通過加入草酸進行；

再優選地，所述離子交換處理包括將經過酸化處理的多粘菌素B發酵液濾液的pH調節為6.7，然后以弱酸性離子交換樹脂吸附，吸附完全后，以按柱體積計的2～3體積的水洗滌至流出液無色，然后以0.2mol/L的硫酸水溶液解吸；優選地，所述弱酸性離子交換樹脂為LXD-135弱酸性離子交換樹脂；所述pH調節采用2M氫氧化鈉溶液進行；

又優選地，所述大孔樹脂吸附處理包括將經過離子交換處理的多粘菌素B發酵液的pH調節為6.5，用大孔吸附樹脂吸附完全后，以按柱體積計的2體積的水頂洗，然后以酸性乙醇水溶液解吸；優選地，pH調節采用2M氫氧化鈉溶液進行；進一步優選地，所述酸性乙醇水溶液是pH值為3的40體積比％乙醇水溶液；

進一步優選地，所述制備方法還包括在步驟1)中，將得到的解吸液濃縮，經活性炭脫色后過濾。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的制備方法，其特征在于，在步驟2)中，用0.5M～10M氫氧化鈉溶液將解吸液的pH調節至5.0～7.0。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的制備方法，其特征在于，在步驟3)中，所述有機溶劑選自C₁～C₄的醇、C₃～C₄的酮或乙酸乙酯或乙酸丁酯中的一種或多種；優選地，所述C₁～C₄的醇選自甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇或丁醇中的一種或多種；再優選地，所述C₃～C₄的酮選自丙酮或2-丁酮中的一種或多種。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的制備方法，其特征在于，在步驟3)中，析出晶體的過程在0～40℃的溫度下進行；

優選地，所述制備方法還包括在步驟3)中，滴加完成后繼續攪拌0～8小時；

更優選地，在步驟3)中，所述干燥為在40～60℃的溫度下真空干燥3～20小時。

7.一種硫酸多粘菌素B結晶，其特征在于，所述硫酸多粘菌素B結晶使用Cu-Ka輻射，以2θ角度表示的X射線粉末衍射圖譜如圖3所示。

8.一種抗菌藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包含根據權利要求1至6中任一項所述的制備方法制備的硫酸多粘菌素B結晶或根據權利要求7所述的硫酸多粘菌素B結晶，以及藥學上可接受的載體；優選地，所述藥物組合物的劑型為片劑、膠囊劑、或顆粒劑；更優選地，所述片劑選自速釋片、咀嚼片、分散片、泡騰片、緩釋片、控釋片或腸溶片，所述膠囊劑選自硬膠囊、軟膠囊、緩釋膠囊、控釋膠囊或腸溶膠囊，所述顆粒劑選自混懸顆粒、泡騰顆粒、腸溶顆粒、緩釋顆粒或控釋顆粒。

9.根據權利要求8所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物還包括一種或多種除硫酸多粘菌素B以外的抗菌活性成分。

10.如權利要求1至6中任一項所述的制備方法制備的硫酸多粘菌素B結晶或根據權利要求7所述的硫酸多粘菌素B結晶在制備抗菌藥物中的應用；優選為在制備用于抗革蘭氏陰性細菌的藥物中的應用；更優選為根據權利要求1至6中任一項所述的制備方法制備的硫酸多粘菌素B結晶或根據權利要求7所述的硫酸多粘菌素B結晶在制備抗耐藥細菌的藥物中的應用，所述耐藥細菌優選為革蘭氏陰性耐藥細菌。