[發明專利]一種多巴胺固相萃取耗材及其制備方法

在審

• 申請號: 201610671683.2
• 申請日: 2016-08-16
• 公開（公告）號: CN106596212A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 文寧鋒
• 申請（專利權）人: 蘇州龍霖生物科技有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;B01D15/10
• 代理公司: 蘇州廣正知識產權代理有限公司32234
• 代理人: 馬云玉

技術領域

本發明專利涉及制備固相萃取耗材。

技術背景

固相萃取是分析樣品預處理技術發展的熱點，可以用于樣品中分析物的分離、純化和富集。固相萃取可用于氣體、液體和固體樣品的處理，廣泛的應用在醫療、食品安全、環境檢測、商品檢驗、化工質控等領域。近年來，微萃取方法得到了長足的發展，與傳統的大型萃取法相比，微萃取回收率更高，分離更有效，速度更快、萃取相用量更少、選擇性更高、預處理過程更簡單，操作更方便。并具有自動化以及與色譜、電泳等檢測手段聯用的可能。然而，固相材料在萃取耗材上的固化始終是個問題。傳統方法使用化學粘合劑來固定萃取相，然而所得萃取液如要應用于醫藥食品領域就存在安全隱患。另一種固定萃取材料的方法使用單層或多層濾膜，該技術制備工藝較繁瑣，多孔濾膜本身性質不同于萃取材料，從而人為相成多層不均一介質并對分析物的吸附和洗脫產生干擾。本發明成功地使用生物粘合劑多巴胺固化萃取材料，無須濾膜層，減少死體積，準確控制分析洗脫時間，縮小樣品損失。

多巴胺是一種天然粘合劑，廣泛存在于海洋貝類動物的分泌物中。多巴胺的化學式為C6H3(OH)2-CH2-CH2-NH2，是具備苯環，雙酚基和氨基的小分子物質。研究已經證明，在合適的pH條件下，多巴胺可以在各種材料表面進行自聚合，形成聚多巴胺層。這也就是為什么貝類動物可以在風浪的多次沖擊下仍能緊緊的附著于堅硬的巖石上。粘合過程涉及不同層次的強弱相互作用，包括氫鍵作用、螯合作用、相互作用和共價作用。對其的研究已成為生物粘合劑應用和發展的一個重要方向。

發明內容

本發明使用多巴胺的自聚合作用來固定萃取相，制備固相萃取和固相微萃取耗材。粘合時多巴胺溶于溶液，所用溶液可以是純水、硫酸鹽、鹽酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、硼酸鹽、碳酸鹽，三羥甲基氨基甲烷、銨鹽以及甘氨酸、TRICINE、BICINE、TES、CHES、HEPES、MES、MOPs等兩性緩沖溶液。

粘結前多巴胺溶液濃度大于1毫克/毫升。pH值介于5-12之間，較佳范圍6-9.5。

制備的萃取耗材包括移液槍吸頭、多孔樣品處理板、注射器、碟狀萃取盤、其他可能形狀的容器以及微米或納米級別顆粒。

萃取耗材制備過程中，先用物理方法在萃取容器中制造小的僅供液體流動的空間，物理方法包括使用濾膜，形成小孔，壓力形成縫隙等方法。加入適量萃取固相后，隨后加入多巴胺溶液，停留適當時間后，多余多巴胺溶液壓力或重力排出。

上述方法也可以用于形成短的濾膜層和濾芯層，隨后其上可以疊加更多同種萃取材料，或其他種類的萃取材料形成復合萃取設備。

萃取材料固化后，萃取容器中原有的僅供液體流動的縫隙結構可以切除，也可以保留。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例中的技術方案，下面將對實施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例。其中：

1、圖1是實例1為萃取所得的葡聚糖階梯；

2、圖2是實例2為萃取所得的葡聚糖階梯;

3、圖3中實例3 為萃取所得的特定蛋白。

具體實施方式

下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅是本發明的一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其它實施例，都屬于本發明保護的范圍。

實例1 制備多孔石墨吸頭進行寡糖純化

1．多孔石墨混合溶液形成懸浮溶液。移液槍吸頭出口形成小孔。加入適量石墨懸浮液，除去液體。加入適量配制好的鹽酸多巴胺溶液。

2．靜止五分鐘，移出溶液。隨后等待吸頭中萃取材料固化。

3. 寡糖純化前分別用適量NaOH溶液，醋酸溶液和乙晴清洗吸頭內萃取材料。

4. 加含寡糖樣品，使樣品緊密接觸碳層,等五分鐘再用真空或重力緩慢推出樣品溶液.

5. 使用純水和醋酸溶液清洗吸頭內萃取材料。

6．使用50 μL的析出液清洗吸頭，收集流出溶液進行色譜分析。

實例2制備離子交換樹脂吸頭進行寡糖純化

1．離子交換樹脂形成懸浮溶液。移液槍吸頭出口形成小孔。迅速加入適量樹脂懸浮液，除去液體。加入適量配制好的鹽酸多巴胺溶液。

2．靜止一段時間，移出溶液。隨后等待吸頭中萃取材料固化。

3．加入更多樹脂懸浮溶液，擴大吸附層體積。