[發(fā)明專利]一種檸檬酸蛋白鐵的制備方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610665771.1
• 申請(qǐng)日: 2016-08-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106279389B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-03-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 阮健;向犇;聶娟;柳威;易家玲;朱玉婷;鄭康
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢華科大生命科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/435
• 分類號(hào): C07K14/435;C07K14/415;C07K14/00;C07K1/30;C07K1/107;A61K38/00;A61P7/06
• 代理公司: 武漢東喻專利代理事務(wù)所(普通合伙)42224
• 代理人: 紀(jì)元

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種檸檬酸蛋白鐵的制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前伴隨著人民生活水平的提高，廣大人民群眾對(duì)身體健康日益重視。為了預(yù)防和控制缺鐵性貧血，采取了多種途徑，如膳食途徑、食物強(qiáng)化等，也取得了很好的效果。然而對(duì)孕婦、兒童以及其他嚴(yán)重缺鐵性貧血等病人，藥物治療就顯得尤為必需。

早期治療方法多以口服無(wú)機(jī)鐵鹽為治療手段，最常見(jiàn)的為硫酸亞鐵。無(wú)機(jī)金屬鐵鹽被人體攝入后，在酸性胃液介質(zhì)中易被電離成為金屬陽(yáng)離子，然后進(jìn)入小腸被人體吸收利用。而小腸壁對(duì)帶有正電荷的金屬離子有一定的排斥作用，導(dǎo)致部分金屬離子不僅不易被吸收，還會(huì)刺激胃腸，引起腹瀉。不同金屬元素之間的拮抗作用也會(huì)使吸收進(jìn)入體內(nèi)的金屬元素利用率和沉積效率受到限制，導(dǎo)致其生物有效性降低。另有文獻(xiàn)報(bào)道亞鐵離子還能催化自由基，具有細(xì)胞毒性。

由于無(wú)機(jī)鐵鹽的種種弊端，人們開(kāi)始尋找新的補(bǔ)鐵藥物。Saltman等研究人員通過(guò)一系列研究，提出了鐵的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。他們認(rèn)為在動(dòng)物腔腸內(nèi)，不論是三價(jià)還是二價(jià)的鐵，都必須與內(nèi)源或外源配位體結(jié)合形成絡(luò)合物，再以此形式吸收并進(jìn)一步轉(zhuǎn)運(yùn)。考慮到藥品安全性，補(bǔ)鐵藥物的代謝產(chǎn)物最好是內(nèi)源性物質(zhì)。研究人員繼而把目光投向了鐵的螯合物。隨后產(chǎn)生了大量的小分子有機(jī)鐵配合物，但是時(shí)至至今，這類物質(zhì)還是以保健食品或添加劑在使用，國(guó)內(nèi)仍然未見(jiàn)物質(zhì)為主藥的真正意義上的藥品。

70年代后期，國(guó)外開(kāi)始研究開(kāi)發(fā)大分子的補(bǔ)鐵藥物，至今，大分子的補(bǔ)鐵藥物研制成功并上市的并不多見(jiàn)，以多糖鐵配合物和蛋白鐵配合物為主。

因此，需要一種載鐵量高，能克服胃腸道副反應(yīng)，最好其代謝產(chǎn)物是內(nèi)源性物質(zhì)的大分子補(bǔ)鐵藥物。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的以上缺陷或改進(jìn)需求，本發(fā)明提供了一種檸檬酸蛋白鐵制備方法及其應(yīng)用，其目的在于通過(guò)檸檬酸蛋白的載鐵反應(yīng)制備得到載鐵量高、代謝產(chǎn)物為內(nèi)源性物質(zhì)的檸檬酸蛋白鐵產(chǎn)品，由此解決現(xiàn)有技術(shù)鐵配合物載鐵量低、存在胃腸道副反應(yīng)的技術(shù)問(wèn)題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，按照本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種檸檬酸蛋白鐵的制備方法，使得檸檬酸蛋白和鐵離子發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)，其反應(yīng)式如下：

式中n為0或1。。

優(yōu)選地，所述檸檬酸蛋白的制備方法為：加入檸檬酸酐和蛋白質(zhì)，使檸檬酸酐與蛋白質(zhì)分子上的伯氨基或仲氨基上的氫發(fā)生取代反應(yīng)。

優(yōu)選地，所述蛋白質(zhì)為動(dòng)物蛋白質(zhì)、植物蛋白質(zhì)或微生物蛋白質(zhì)。

優(yōu)選地，所述動(dòng)物蛋白質(zhì)為酪蛋白、乳蛋白和/或膠原蛋白中的一種或多種，所述動(dòng)物蛋白質(zhì)優(yōu)選為酪蛋白。

優(yōu)選地，所述植物蛋白質(zhì)為大豆蛋白、胚芽蛋白、花生蛋白和/或螺旋藻蛋白中的一種或多種，所述植物蛋白質(zhì)優(yōu)選為大豆蛋白。

優(yōu)選地，所述的檸檬酸蛋白的制備方法，包括如下步驟：

(1)溶解檸檬酸蛋白

向檸檬酸蛋白中加入10～20倍重量的水，混合均勻，采用氫氧化鈉溶 液調(diào)節(jié)pH至檸檬酸蛋白溶解完全，得檸檬酸蛋白溶液；

(2)載鐵

向步驟(1)獲得的檸檬酸蛋白溶液中逐滴加入質(zhì)量百分比濃度為1％～4％的FeCl₃溶液，所述檸檬酸蛋白和FeCl₃的重量比為1:0.1～0.4，使用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)控制溶液pH 6～10，確保無(wú)沉淀析出，固液分離，上清液即為檸檬酸蛋白鐵粗品溶液；

(3)純化

用酸性溶液調(diào)節(jié)所述檸檬酸蛋白鐵粗品溶液的pH至1.0～4.0，使檸檬酸蛋白鐵完全沉淀，去離子水洗滌沉淀至檸檬酸蛋白鐵中游離鐵含量不超過(guò)0.01％，得檸檬酸蛋白鐵濕品；

(4)干燥

將步驟(3)得到的檸檬酸蛋白鐵濕品置于溫度50～60℃下干燥至水分低于5％，得到檸檬酸蛋白鐵產(chǎn)品。

優(yōu)選地，所述步驟(2)中FeCl₃的質(zhì)量百分比濃度為2％～3％。

優(yōu)選地，所述步驟(2)中檸檬酸蛋白與FeCl₃的重量比為1:0.2～0.3。

優(yōu)選地，所述步驟(3)中酸性溶液為鹽酸。

按照本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了一種檸檬酸蛋白鐵的應(yīng)用，應(yīng)用于制備治療缺鐵性貧血的藥物。

總體而言，通過(guò)本發(fā)明所構(gòu)思的以上技術(shù)方案與現(xiàn)有技術(shù)相比，能夠取得下列有益效果。