[發明專利]一種從薏苡莖中提取豆甾醇的方法

有效

• 申請號: 201610646236.1
• 申請日: 2016-08-09
• 公開（公告）號: CN106380501B
• 公開（公告）日: 2018-04-24
• 發明（設計）人: 黃鎖義;秦建鮮;廖獻就;王露瑤;黃上峰;梁凌玲;潘喬丹;喻巧容
• 申請（專利權）人: 右江民族醫學院
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司45114
• 代理人: 鄒超賢

技術領域

本發明涉及植物甾醇的生產制備領域，具體涉及一種從薏苡莖中提取豆甾醇的方法。

背景技術

豆甾醇(stigmaster01)，C₂₉H₄₅₀。分子量為412，又稱豆甾一5，22一二烯一3B一醇或24R一乙基膽甾一5，22一二烯一3 B一醇,是一種植物甾醇，廣泛存在于多種植物中。豆甾醇具有顯著的抗氧化、抗腫瘤、抗心血管病等多種藥理活性，也是合成甾類藥物的起始原料，在醫藥、食品和化工等行業均有應用。近年來，隨著新甾體藥物的發現、生產的發展、生產規模的擴大、原料需要量也逐漸增加；另一方面由于不合理的采掘，造成資源短缺，植物中皂甙含量下降，使國際市場供需出現矛盾，如何獲得更多更高純度的豆甾醇是豆甾醇研究的一個重要方向。

薏苡(Coix lachryma－jobi L．)為禾本科(Gramineae)薏苡屬，味甘淡，性微寒，具有健脾、補肺、清熱、利濕的功效，素有“滋補保健之王”的美譽。目前對薏苡的化學成分研究比較少，且較多集中在薏苡仁，其藥理活性研究方面的文獻報道也不多，生物活性作用物質基礎不明確，導致其在臨床上的應用受到局限。研究證明薏苡莖含有甾體、多糖、黃酮、有機酸、鞘質、三萜等化學成分，因此研究如何從薏苡中提取豆甾醇能夠更加充分利用薏苡資源。

公開號為CN1374319A的中國專利公開了一種從混合植物甾醇中提取豆甾醇的方法，該方法用溶劑法富集豆甾醇，主要工序包括水浴溶解、降溫養晶、保溫抽濾，其溶劑采用正庚烷與二氯乙烷混合溶劑，正庚烷：二氯乙烷=l﹕1～2，l﹕1．5～1．8最佳。其中混合植物甾醇與溶劑的質量體積比(m／V)為l﹕3～5，1﹕3．5～4．5最佳。水浴溶解溫度為70～75℃。水浴降溫降至20～25℃，保持恒溫養晶12～24小時。每次結束后，將上一次的提取物按同樣工藝進行下一次重結晶，重復2—6次，重復次數決定提取豆甾醇的含量。濾液經低溫處理，溫度為-10℃，回收甾醇和溶劑。該方法溶劑耗量大，生產廢料多，能量消耗大，甾醇得率低。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供一種從薏苡莖中提取豆甾醇的方法，本發明的方法能夠保持產品的天然特性，工藝步驟少，操作條件溫和，溶劑毒性低，生產工藝安全，提取效率高，產品純度高達99%。

本發明通過以下技術方案實現：

一種從薏苡莖中提取豆甾醇的方法，包括以下步驟：

（1）酶解：將薏苡莖放入粉碎機中粉碎得薏苡莖粗粉，在薏苡莖粗粉中加入纖維素酶和果膠酶，然后溶于粗粉重量1～3倍的水，在30～50℃下酶解5～8h，過濾，干燥，得到酶解薏苡莖粉；

（2）超聲波提取：將酶解薏苡莖粉和無水乙醇加入超聲波設備中進行超聲波提取，過濾，得提取液，將提取液放入旋轉蒸發儀中進行減壓濃縮，得浸膏A；

（3）皂化：將浸膏A溶于10～50wt％的氫氧化鈉的乙醇溶液中，充分攪拌，在40～70℃下皂化1～3h，反應液用鹽酸中和至中性，然后用飽和食鹽水和石油醚萃取，棄去水相，石油醚相用旋轉蒸發儀進行減壓濃縮，得浸膏B；

（4）尿素柱層析：將尿素溶于負載溶劑中，然后加入硅膠，使尿素負載在硅膠上，除去負載溶劑，制得固定相；將固定相裝柱，然后將浸膏B上柱，用洗脫劑注入層析柱進行洗脫至無豆甾醇流出，收集洗脫液，通過薄層層析跟蹤檢測，合并與豆甾醇標準品Rf值相同的洗脫液，濃縮得豆甾醇粗品；

（5）結晶：將豆甾醇粗品溶于甲醇中，結晶，過濾，得到豆甾醇純品。

優選地，以上所述纖維素酶和果膠酶加入的重量為薏苡莖粗粉重量的0.1～1%，纖維素酶和果膠酶以任意比例混合。

優選地，以上所述酶解薏苡莖粉和無水乙醇的料液比1:10～15。

優選地，以上所述多頻超聲波提取為雙頻或三頻超聲波提取，采用雙頻超聲波提取時，兩種超聲波的頻率為20～40kHz和20～60kHz，功率為50～200W、100～500W，提取時間為20～40min；采用三頻超聲波提取時，三種超聲波的頻率為20～40kHz、20～60kHz、500～1000kHz，功率為50～200W、100～500W、500～2000W，提取時間為10～25min。

優選地，以上所述10～50wt％的氫氧化鈉的乙醇溶液與浸膏A的料液比為3～10:1。

優選地，以上所述負載溶劑為無水乙醇或75～95%的乙醇-水溶液。

優選地，以上所述尿素和硅膠的質量比為1～10:3。