[發明專利]一種丙型肝炎病毒三價亞單位疫苗的制備及應用

有效

• 申請號: 201610595121.4
• 申請日: 2016-07-26
• 公開（公告）號: CN107648601B
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發明（設計）人: 鐘勁;黃忠;顏雨;王雪松;李大鵬
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海巴斯德研究所
• 主分類號: A61K39/29
• 分類號: A61K39/29;A61K39/39
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 陳詳;徐嘉慧

本發明提供了一種丙型肝炎病毒三價亞單位疫苗的制備及應用。將分別來源于HCV病毒Con1、H77、和S52病毒株的sE2蛋白混合制備的三價疫苗(Con1/H77/S52三價苗)，能夠大幅提升小鼠對多種株型病毒的免疫能力，實驗結果表明，與來源于Con1、H77或S52病毒株的單價苗相比，Con1/H77/S52三價苗極大地提升了針對HCV主要流行亞型病毒的中和水平。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明涉及一種丙型肝炎病毒三價亞單位疫苗的制備及應用。

背景技術

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是危害全球公共健康的嚴重問題。目前全球已經有超過1.7億HCV慢性感染病例，每年還有3到4百萬新發病例。據統計，80％的HCV感染者會轉為慢性感染，其中25％可能發展為肝硬化，其中又有20％可能發展為肝癌。

丙型肝炎病毒是黃病毒科肝炎病毒屬的單鏈正義RNA病毒，基因組約9.6kbp。HCV基因組共編碼10個病毒蛋白，包括核蛋白Core、包膜糖蛋白E1和E2在內的結構蛋白，以及包括P7,NS2,NS3,NS4A,NS4B,NS5A和NS5B在內的非結構蛋白。

丙型肝炎的傳統治療手段主要為利巴韋林合并干擾素治療，該方法副作用較大、持續病毒學應答(sustained virological response,SVR)不高且存在顯著的型間和人群間差異。2014年，隨著多種針對HCV的新一代抗病毒藥物(direct-acting antiviralagents,DAA)在國外上市，丙型肝炎治療方法發生了革命性的進步，新的DAA療法將丙型肝炎的SVR提高到90％以上，讓人們看到了根除HCV的希望。

但DAA的上市并不意味著HCV的徹底根除。首先，昂貴的價格極大限制了這些DAA在中低收入國家的使用、即使在發達國家的使用也可能被限制在特定人群中。其次，這些DAA多作用于非結構蛋白NS3/4A和NS5A上的固定位點，考慮到HCV復制中的高突變率，存在出現耐藥性突變病毒的可能性。第三，DAA并不能排除治愈后再感染的可能性，對于高暴露、高危人群仍缺乏有效的長期保護手段。另外，這些DAA的臨床數據多來源特定群體(如無肝纖維化的中年白人男性)，在許多復雜情況下(如3型感染、纖維化等肝代償性疾病、肝移植、腎衰竭等)的清除效果還不明確，對于兒童和孕婦的作用效果也缺乏報道；有報道甚至觀察到采用無干擾素DAA療法的HCV相關肝癌手術病人存在較高的早期癌癥復發率。最后，由于起病隱匿、發病癥狀不明顯，丙型肝炎存在著“認知率低、就診率低、治療率低”的特點。據估計，在中國HCV的就診率僅為1.6％-10％左右，相當部分的病人覺察到癥狀而就診時已經發展到肝硬化甚至肝癌階段。這意味著大量晚期階段才被發現的HCV病例仍然無法治愈，HCV慢性感染及其所引發的肝硬化和肝癌等終身疾病仍是公共衛生領域的巨大負擔。因此，盡快研制安全有效的HCV預防性疫苗對于控制和消除HCV感染，減輕HCV這一全球性的長期公共衛生負擔具有不可忽視的意義。

由于該病毒存在基因序列的高度變異性、糖基化漂移等免疫逃逸特質，目前尚無針對HCV的有效疫苗。但臨床數據顯示在高慢性化率之外，仍有20-25％的病人可通過早期產生的中和抗體及T細胞免疫反應自發地清除HCV病毒；另一些證據顯示在黑猩猩和人身上存在的保護性免疫記憶能大量降低二次感染的病毒載量以及肝臟炎癥反應等病理現象。這表明，感染早期的中和抗體產生對于抵抗和消除HCV的感染至關重要，也為預防性HCV疫苗的研究提供了理論基礎和依據。

國際上已有的HCV候選疫苗主要分為預防性與治療性兩種。預防性疫苗多在結構蛋白的基礎上設計，以誘導高滴度的廣譜中和抗體、中和入侵的HCV病毒為主要目的。而治療性疫苗多在非結構蛋白的基礎上設計，主要以誘導多功能T細胞反應、清除已存在的病毒感染為目的。目前已有多種HCV候選疫苗處于研發階段，但進入臨床試驗的疫苗僅有少數，如預防性疫苗E1/E2重組蛋白聯合MF59佐劑(CHO細胞表達)，治療性疫苗DNA疫苗ChronVac-C、人重組腺病毒疫苗Ad6NS、黑猩猩重組腺病毒疫苗AdCh3NS和重組麻疹病毒MVA-NS。