[發明專利]一種提高吩胺霉素發酵產量的方法

在審

• 申請號: 201610583769.X
• 申請日: 2016-07-22
• 公開（公告）號: CN107641633A
• 公開（公告）日: 2018-01-30
• 發明（設計）人: 丁千嶺;張紅艷;馮鎮泰
• 申請（專利權）人: 上海農樂生物制品股份有限公司
• 主分類號: C12P17/12
• 分類號: C12P17/12;C12R1/38
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司31225
• 代理人: 林君如

技術領域

本發明涉及生物發酵領域，具體涉及一種制備吩胺霉素及提高其發酵產量的方法。

背景技術

吩胺霉素又名吩嗪-1-甲酰胺(Phenaizne-1-carboximade,PCN)，屬吩嗪類化合物，分子式C₁₃H₉N₃O，分子量223.23，化學結構式如下：

吩胺霉素在有機溶劑中的結晶純品為綠色晶體，沸點526.1±15.0℃，閃點272±20.4℃，溶于醇、醚﹑乙酸乙酯﹑氯仿和苯等有機溶劑，微溶于水，在偏酸性及中性條件下穩定。假單胞菌nl003是從水稻根際土壤樣品中分離獲得，它的代謝產物PCN能有效防治危害水稻﹑瓜果和蔬菜的多種真菌和細菌性病害，吩胺霉素具有對動物毒性低，保護生態環境，殘留時間短等優點，是很有前景的微生物源綠色農藥。

目前，發酵吩胺霉素所用的培養基為甘油、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈉，該配方存在的不足之處是發酵產量低，如何實現在滿足發酵條件的同時，又能提高吩胺霉素的發酵產量是亟需解決的問題。

發明內容

本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種提高吩胺霉素發酵產量的方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：

一種提高吩胺霉素發酵產量的方法，該方法采用假單胞菌在培養基中通過 有氧發酵制備吩胺霉素，所述的培養基中含有復合氨基酸粉。

優選地，所述的假單胞菌為綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)，其微生物保藏登記號為：CGMCC No.7846；保藏時間：2013年7月3日；保藏單位：保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心China General Microbiological Culture Collection Center(CGMCC)；保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院，中國科學院微生物研究所。

優選地，所述的復合氨基酸粉為銨型氨基酸粉，含有有機氮和無機氮，氨基酸總量大于40wt％，小于100wt％，其中，苯丙氨酸的含量為3-6wt％，酪氨酸的含量為3-5wt％，總氮含量大于17wt％，小于100wt％。

進一步優選地，苯丙氨酸的含量為4.65wt％，酪氨酸的含量為4.21wt％。

優選地，所述的培養基中的復合氨基酸粉的質量百分比為0.5-2％。

進一步優選地，所述的培養基由以下質量百分比含量的組分：

余量為水。

優選地，有氧發酵過程中，培養溫度為26-30℃，通氣比為1:0.2-0.6，發酵罐壓力為0.03-0.05MPa，溶氧控制在40％以上，發酵罐帶有攪拌裝置，轉速為100-140rpm，發酵周期為40-46小時。

進一步優選地，有氧發酵過程中，培養溫度為28℃，通氣比為1:0.4，發酵罐壓為0.04MPa，溶氧控制在40％以上，攪拌裝置轉速為120rpm，發酵周期為43小時。

與現有技術相比，本發明具有以下有益效果：本發明在培養基中添加復合氨基酸粉，其所含氮源平衡了原培養基中碳源、氮源、無機鹽的配比，使培養綠針假單胞菌的營養均衡，促進綠針假單胞菌菌體的繁殖，提高酚胺霉素的產量。其所含苯丙氨酸和酪氨酸既可供綠針假單胞菌菌體氮源，又可用作酚氨霉 素合成之用。本發明的復合氨基酸粉和培養基中的其他組分(特別是蛋白胨和甘油)的添加量及配比有利于菌體的繁殖和產物的積累，如果碳氮比過大，菌體繁殖數量少，不利于產物的積累；當碳氮比合適，但碳源、氮源濃度過高時(培養基中的碳源和氮源含量過多)，能導致菌體的大量繁殖，增大發酵液粘度，影響溶解氧濃度，容易引起菌體的代謝異常，影響產物合成，不利于產物的積累；如果碳氮比合適，但碳源、氮源濃度過低，會影響菌體的繁殖，同樣不利于產物的積累。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明進行詳細說明。

以下實施例用于說明本發明，但不用于來限制本發明的范圍。

下述實施例所使用的實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法。

下述實施例所使用的材料，如無特殊說明，均為商業獲得。

下述實施例中培養基中的余分為水。