[發明專利]厭氧降解處理采油廢水的梭菌屬菌株YB-6的培養方法

有效

• 申請號: 201610566033.1
• 申請日: 2016-07-19
• 公開（公告）號: CN106479911B
• 公開（公告）日: 2018-09-11
• 發明（設計）人: 劉宇輝;解慶林;劉利
• 申請（專利權）人: 桂林理工大學;賀州學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C02F3/28;C12R1/145;C02F103/10
• 代理公司: 暫無信息
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本發明公開了一種厭氧降解處理采油廢水的梭菌屬菌株YB?6的培養方法。將活性污泥經過梯度稀釋后選擇10^?6~10^?8濃度的菌液采用平板涂布法涂布于強化梭菌培養基中，然后置于厭氧培養箱中于37℃下分離培養7天，接著從強化梭菌培養基中挑選長勢好、形態各異的單菌落，分別采用劃線培養法接種于新的強化梭菌培養基中，然后置于厭氧培養箱中于37℃下培養7天，即篩選得到梭菌屬菌株，其菌落白色，不規則形，表面光滑，不透明，邊緣不整齊，命名為YB?6，然后對YB?6分別進行三次純化培養，得到無其他雜菌干擾的純的梭菌屬菌株YB?6。本發明所培養的梭菌屬菌株YB?6對采油廢水的厭氧降解處理效果良好，便于推廣應用。

技術領域

本發明屬于環境污染物生物處理技術領域，特別涉及一種厭氧降解處理采油廢水的梭菌屬菌株YB-6的培養方法。

背景技術

采油廢水主要是石油開采、儲藏、運輸、脫水和再利用過程中產生廢水的混合物。采油廢水成分復雜，主要含有淤泥和泥沙等固體懸浮物、溶解的油質、苯的有機物、硫化氫、銅和鎳等重金屬以及硫酸鹽等組分，同時其具有COD含量高、BOD含量低、毒性高和溶解性油難去除等特點，因此屬于難降解廢水。采油廢水的組分是持續變化的，這主要與所提煉油的性質、階段和油水層的地質特征有關，所以如何利用現有技術高效穩定環保的處理采油廢水是企業所關注的焦點。如今，采油廢水的物化處理方法主要包括電化學法、吸附法、臭氧法、絮凝法和催化法，但是物化處理工藝存在高能耗、低產率和二次污染等問題，并不符合國家節能環保的要求。相比之下，生物法效率高投入低，處理效果穩定。目前主要的生物處理法包括活性污泥法、生物膜法、厭氧-好氧法和自然人工濕地處理法，重視并應用生化處理技術是國內外采油廢水處理的趨勢。

生物處理工藝中厭氧法可以穩定有機物密度和種類，有一定的抗沖擊負荷能力；好氧法則可以徹底的去除廢水中的有機物。雖然厭氧法或者好氧法均能處理廢水，但是單一的好氧或者厭氧工藝均存在一定的局限性。為了更好的處理廢水中的有機物，越來越多的研究者將兩個或兩個以上工藝組合起來，以提高廢水的處理效果。本研究中的采油廢水處理廠采用ABR-SBR聯用工藝，COD、石油類、SS、S^2-的去除率分別為83-94%，78-92%，99%和94%，出水達到《城鎮污水處理廠污染物排放標準》（GB18918-2002）一級排放標準。因此，本申請從ABR活性污泥池內篩選出高效石油降解厭氧菌株，為下一步構建高效除油菌劑提高采油廢水的處理效果具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種厭氧降解處理采油廢水的梭菌屬菌株YB-6的培養方法。

具體步驟為：

(1)將活性污泥經過梯度稀釋后選擇10^-6~10^-8濃度的菌液采用平板涂布法涂布于強化梭菌培養基中，并將強化梭菌培養基置于厭氧培養箱中于37℃下分離培養7天，待選備用。

(2)從步驟(1)所得的待選備用的強化梭菌培養基中挑選長勢好、形態各異的單菌落，分別采用劃線培養法接種于新的強化梭菌培養基中，然后將強化梭菌培養基置于厭氧培養箱中于37℃下培養7天，即篩選得到在強化梭菌培養基中生長良好的梭菌屬菌株，其菌落白色，不規則形，表面光滑，不透明，邊緣不整齊，命名為YB-6，然后對YB-6分別進行三次純化培養，得到無其他雜菌干擾的純的梭菌屬菌株YB-6。

所述活性污泥為采油終端處理廠的厭氧折流板反應器中的污泥，即AnaerobicBafflted Reactor中的污泥，簡稱ABR污泥。

所述強化梭菌培養基的組成如下：牛肉浸出粉9~11g/L，胨9~11g/L，酵母浸出粉2~4g/L，可溶淀粉0.5~1.5g/L，葡萄糖4~6g/L，鹽酸半胱氨酸0.5~1g/L，氯化鈉4~6g/L，醋酸鈉2~4g/L，瓊脂的質量百分數含量為2%；該強化梭菌培養基的pH值6.8±0.2。