[發明專利]一種單反應控溫高通量微流控芯片核酸擴增裝置有效
| 申請號: | 201610556261.0 | 申請日: | 2016-07-15 |
| 公開(公告)號: | CN107619781B | 公開(公告)日: | 2022-01-25 |
| 發明(設計)人: | 鄒明強;薛強;殷宏 | 申請(專利權)人: | 中國檢驗檢疫科學研究院;中檢國研(北京)科技有限公司 |
| 主分類號: | C12M1/34 | 分類號: | C12M1/34;B01L3/00;B01L7/00 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 反應 控溫高 通量 微流控 芯片 核酸 擴增 裝置 | ||
一種單反應控溫高通量微流控芯片核酸擴增裝置,包括微流控芯片、加熱模塊、檢測模塊;通過微流控芯片與加熱模塊、檢測模塊相互配合,實現單反應控溫擴增反應及實時熒光檢測,滿足POCT現場快速檢測的需求;其中,微流控芯片包括多個反應腔,每個反應腔允許實現不同溫度的LAMP反應,芯片結構組成包括蓋片、結構片、底片,底片中存放有熱膨脹微球顆粒,在芯片加熱初始階段迅速膨脹使反應芯片上的彈性薄膜變形,封閉反應腔與外界的連接通道;加熱模塊由相互獨立的多個加熱子模塊構成,各子模塊反應溫度可獨立設置,且互不影響,各加熱子模塊對LAMP芯片中的多反應腔實施獨立加熱控制;利用一體化光電檢測模塊對多反應腔進行多波長巡檢,實現實時LAMP擴增檢測。
技術領域
本發明涉及生命醫學檢測及疾病診斷領域,尤其涉及一種基于環介導等溫擴增(LAMP)原理,用于微流控芯片的單反應控溫高通量核酸擴增檢測裝置。
背景技術
近年來,在分子診斷學領域,除了普通PCR方法外,涌現出了多種用于核酸檢測與分析的等溫擴增技術,如LAMP、NASBA、RCA等。普通PCR反應涉及到2-3個不同的反應溫度,與此不同,等溫擴增往往在某個單一溫度條件下完成。而且,等溫擴增所需的反應時間往往少于PCR反應時間。作為一種出現時間較早,技術發展較為成熟的等溫擴增技術,LAMP等溫擴增由于反應溫度條件較為簡單,而且所需反應時間較短,正日益受到人們的關注與重視,在核酸檢測領域占據越加重要的地位。
微流控芯片在微尺度空間下,借助各類功能單元來完成生物化學反應所需的多個反應步驟,為生物醫學診斷、分析化學、生命科學等領域提供了一個具有獨到優勢的技術平臺。除了有利于實現整個檢測、分析、診斷過程的自動化外,微流控芯片的反應器體積往往要顯著小于傳統的反應試管,這既節省了反應試劑,同時也有利于減少反應時間。因此,基于微流控芯片的LAMP等溫擴增方法正日益受到各國科研人員的關注。基于微流控技術,一方面可以減少LAMP等溫擴增所需的反應時間與試劑消耗,另一方面,有利于實現高通量檢測,提高檢測效率。因此,基于新型的加熱技術及檢測技術來實現靈活度高、適應性強的高通量LAMP等溫擴增,一方面有利于提高LAMP核酸檢測的靈活度,拓展適用范圍,另一方面有利于降低裝置復雜度及核酸檢測的成本。
發明內容
本發明目的在于提供一種POCT型的單反應控溫高通量核酸擴增反應檢測裝置,該裝置能夠提供基于微流控芯片的單反應控溫高通量LAMP擴增,允許進行針對不同靶標的單反應控溫LAMP實時熒光檢測。
為實現上述目的,本發明采用的技術方案為一種基于微流控芯片的POCT(Point-of-Care Test)型單反應控溫高通量LAMP擴增檢測裝置,該反應檢測裝置包括微流控芯片、加熱模塊、檢測模塊;通過微流控芯片與加熱模塊、檢測模塊的相互配合,實現單反應控溫多反應腔LAMP實時檢測;
其中,微流控芯片包括蓋片3、結構片4和底片5;
所述蓋片3位于結構片4的頂部,用以封閉結構片4,結構片4中間內部平行分布有數個反應腔6,各個反應腔6的兩端分別設置有注入通道10和氣孔通道11;蓋片3上有注入孔1和氣孔2;注入通道10與氣孔通道11的底端分別構建有彈性薄膜7;
平行分布的反應腔6之間設置有絕熱槽8,與結構片4中絕熱槽8相對應的位置,蓋片3與底片5均設有絕熱槽8,絕熱槽8中配置有絕熱板19;
所述底片5固定在結構片4的底部,底片5內部設置有與各注入通道10和氣孔通道11相對應的空腔,空腔中存放著熱膨脹微球顆粒9;
蓋片3、底片5與結構片4相互配合,最終成為一個完整的LAMP反應芯片;
加熱模塊包括導熱鋁片12和數組功率電阻13;每組功率電阻13以串聯形式緊密貼合在導熱鋁片12的底部;
檢測模塊包括一體化光電檢測模塊15、運動導軌14、底座16;
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