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[發明專利]一種重組雞β?防御素?13畢赤酵母的發酵培養基在審

專利信息
申請號: 201610529021.1 申請日: 2016-07-06
公開(公告)號: CN107586812A 公開(公告)日: 2018-01-16
發明(設計)人: 張鈞利;潘康成;張新華;周堯 申請(專利權)人: 無錫太科養晟生物技術有限公司
主分類號: C12P21/02 分類號: C12P21/02;C12R1/84
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 214000 江蘇省*** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 重組 防御 13 酵母 發酵 培養基
【說明書】:

技術領域

發明涉及一種重組雞β-防御素-13畢赤酵母的發酵培養基。

背景技術

目前,抗生素的廣泛應用給人類的生活帶來巨大改變,抗生素的長期濫用給養殖業帶來了諸多弊端,如:耐藥菌株的產生往往與抗生素的長期使用有關,其后果是使抗生素不僅達不到治療疾病的目的,還有可能影響到其他藥物的使用。抗生素在動物產品中的殘留現象十分普遍,可能影響到人類的健康水平,甚至造成嚴重的疾病問題。因此,人們對抗生素替代品的需求也越來越強烈,具有抗菌能力的生物活性抗菌肽開始被人類深入研究。

防御素是抗菌肽家族中最大的一類重要的內源性抗菌肽,具有穩定而獨特的分子結構和多種生物活性,其主要分子特性為由6個半胱氨酸殘基組成的3個二硫鍵。其主要生物活性表現為具有廣譜的抗菌活性,能有效殺滅細菌、真菌、病毒和螺旋體等。從防御素結構特點方面考慮,其主要包括植物防御素、昆蟲防御素、α-防御素、β-防御素和θ-防御。β-防御素主要分布于人、鼠、牛、羊、豬、駱駝及雞和火雞的多種器官上皮細胞內,同時也存在于牛和鹿中性粒細胞以及雞和火雞的異嗜性白細胞內。

雖然防御素具有獨特的生物活性和抑菌作用,但要成為一種替代抗生素的新藥物,還有相當多的困難要克服。防御素的獲取途徑包括天然狀態的防御素、化學合成防御素和基因工程方法獲得。天然狀態獲取方法無論在方法或者產量上都有一定的局限性,很難達到生產需要。

化學合成法也不盡如人意。因此通過基因工程法獲取防御素成為目前最為可行的一種方法。

目前使用最多的發酵培養基是BMMY培養基。BMMY培養基所用有機氮源的單位成本過高,因此只適合小規模發酵。為了在保障發酵效果,有必要找到一種更加經濟的發酵培養基,從而有利于重組雞β-防御素-13畢赤酵母大規模發酵生產。

發明內容

本發明目的是針對現有技術存在的缺陷提供一種重組雞β-防御素-13畢赤酵母的發酵培養基。

本發明為實現上述目的,采用如下技術方案:一種重組雞β-防御素-13畢赤酵母的發酵培養基,按體積計,所述培養基含有以下組分:

優選的,按體積計,所述培養基含有以下組分:

優選的,按體積計,所述培養基含有以下組分:

優選的,按體積計,所述培養基含有以下組分:

優選的,按體積計,所述微量元素液含有以下組分:

本發明的培養基在重組雞β-防御素-13畢赤酵母中的應用。

本發明的有益效果:本發明所述的重組雞β-防御素-13畢赤酵母的發酵培養基的積極進步效果在于:在降低單位發酵成本的基礎上,提高了雞β-防御素-13的表達量,使得重組雞β-防御素-13畢赤酵母用于大規模發酵生產變得積極可行。

具體實施方式

本發明申請所涉及的重組雞β-防御素-13畢赤酵母菌由四川農業大學動物醫學院動物微生態工程研究中心提供。

第一步,培養基的配制

在本發明申請所述實施例中所使用的培養基按培養基的總體積計,含有以下成分:1)一級種子培養基:YPD培養基

蛋白胨20g/L;

酵母浸粉10g/L;

葡萄糖20g/L。

2)二級種子培養基:BMGY培養基

3)BMMY發酵培養基

4)新型發酵培養基

在上述新型發酵培養基的基礎上,按表1所示的配方分別配制培養基,得到三種不同的培養基,分別命名為一號,二號和三號培養基。

表1培養基成分

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