[發明專利]微生物發酵生產單細胞蛋白和單細胞油脂的方法

在審

• 申請號: 201610507331.3
• 申請日: 2016-06-30
• 公開（公告）號: CN107557309A
• 公開（公告）日: 2018-01-09
• 發明（設計）人: 胡鵬;肖偉;曹真;張猛;胡凡
• 申請（專利權）人: 上海吉態來生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/18;C12N1/16;C12N1/14;C12P7/64
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司31100
• 代理人: 韋東

1.一種微生物發酵方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)在無菌的有機酸發酵液中接入微生物種子液；和

(2)在好氧條件下進行發酵，發酵期間流加無菌的有機酸發酵液。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述有機酸發酵液中所含的有機酸為甲酸、乙酸、丙酸、乳酸和丁酸中的一種或任意多種的組合；

優選地所述有機酸發酵液中有機酸的含量為1～5％，優選2～4％；

優選地，所述有機發酵液的pH在6.5～8.0的范圍內，例如6.5～7.5、6.5～7.0或6.5～6.8；

優選地，所述發酵液還含有酵母膏、氮源如硫酸銨、硫酸鎂和鉀鹽如磷酸氫二鉀和/或磷酸二氫鉀，其中，酵母膏的含量為0.05～2.5g/L，氮源如硫酸銨的含量為0.05～2.5g/L，硫酸鎂的含量為0.05～2.5g/L，鉀鹽的含量為0.05～5.0g/L；和

優選地，所述有機酸發酵液來自以合成氣為原料產生的有機酸發酵液。

3.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，在以下條件下進行步驟(2)所述的發酵：

接種量：1～30％，例如5～25％、5～20％或5～15％；

發酵溫度：25～40℃，例如25～35℃或28～32℃；

通氣量：0.5～2.0vvm，例如0.8～1.8vvm、1.0～1.8vvm或1.2～1.8vvm；和

pH：6.5～7.5，如6.8～7.2。

4.如權利要求1－3中任一項所述的方法，其特征在于，步驟(2)的發酵是分批發酵、補料分批發酵或連續發酵；

優選地，步驟(2)所述發酵是補料分批發酵；

優選地，步驟(2)所述發酵是補料分批發酵，補料方式是連續流加、不 連續流加或多周期流加；優選地，補料的方式使得發酵罐中的有機酸含量控制在0～0.5％的范圍內，例如控制在0.05～0.5％，或者0.1～0.4％，或者0.1～0.3％，或者0.2～0.5％，或者0.2～0.4％的范圍內。

5.如權利要求1－4中任一項所述的方法，其特征在于，所述微生物為酵母，紫色非硫光合細菌，霉菌，或它們的兩種或多種的組合；

優選地，所述酵母選自：淺白色隱球酵母(Cryptococcus albidus)，彎隱球酵母(Cryptococcus albidun)，斯達氏油脂酵母(Lipomyces starkeyi)，茁芽絲孢酵母(Trichospiron pullulans)，產油油脂酵母(Lipomyces lipofer)，膠粘紅酵母(Rhodotorula giutinis)，類酵母紅冬孢(Rhodosporidium toruloides)，亞羅解脂酵母(Yarrowia lipolytica)，產朊假絲酵母(Candida utilis)，熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)，園擬酵母(Torula utilis)，球擬酵母(Torulopsis utilis)，釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，亞羅解脂酵母(Yarrowia lipolytica)，或它們的兩種或多種的組合；

優選地，所述紫色非硫光合細菌選自：沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)，類球紅假單胞菌(Rhodobacter sphaeroides)，嗜酸紅假單胞菌(Rhodopseudomonas acidophilus)，莢膜紅假單胞菌(Rhodopseudomonas capsulata)，紅螺菌(Rhodospirillum)，或它們的兩種或多種的組合；

優選地，所述霉菌選自：土霉菌(Asoergullus terreus)，紫癱麥角菌(Clavicepspurpurea)，高粱褶抱黑粉菌(Tolyposporium)，高山被孢霉(Mortierella alpina)，深黃被孢霉(Mortierrella isabellina)，或它們的兩種或多種的組合。