[發明專利]一種雙層包埋的諸葛菜人工種子制作方法

有效

• 申請號: 201610507227.4
• 申請日: 2016-06-30
• 公開（公告）號: CN106134995B
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: 吳沿友;谷睿智;邢德科;吳沿勝;姚香萍;黎明鴻;付為國
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種雙層包埋的諸葛菜人工種子制作方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟(1)，諸葛菜的芽簇誘導：取諸葛菜幼苗,無菌水沖洗，切取腋芽和頂芽，消毒后接種在芽簇誘導培養基上進行芽簇誘導培養；

步驟(2)，諸葛菜的芽繁培養：取步驟(1)芽誘導培養的諸葛菜組培苗，切取幼芽，轉接到芽繁培養基上進行芽繁培養；

步驟(3)，諸葛菜芽的包埋和人工種子膠囊制備：取步驟(2)中在芽繁培養基上生長的幼芽，切取若干個一定長度的芽并逐個放在內種皮包埋液表面，所述內種皮包埋液是含納米二氧化鈦nTiO₂、NAA、MS培養基和蔗糖的質量濃度為6％海藻酸鈉水溶膠；用玻璃吸管先吸取少量包埋液，再吸入一個諸葛菜芽，然后滴入質量濃度為2％的CaCl₂溶液中，絡合反應9-11min形成固態人工種子；用鑷子取出所述固態人工種子，放在外種皮包埋液中，使外種皮均勻裹上一層包埋液，所述外種皮包埋液是含有納米二氧化鈦nTiO₂、納米二氧化硅nSiO₂的質量濃度為7％或8％海藻酸鈉水溶膠；用鑷子將人工種子取出，放入質量濃度為2％的CaCl₂溶液中，絡合反應1.5-2.5min形成雙層包埋的固態人工種子。

2.根據權利要求1所述的一種雙層包埋的諸葛菜人工種子制作方法，其特征在于，所述步驟(1)中的芽簇誘導培養基的成分包括：MS培養基、2mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA、3％蔗糖及0.65％瓊脂；芽簇誘導過程的光照強度為2000～3000Lux日光燈照射12小時。

3.根據權利要求1所述的一種雙層包埋的諸葛菜人工種子制作方法，其特征在于，所述步驟(2)中的芽繁培養基的成分包括：MS培養基、2.5mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA、3％蔗糖及0.65％瓊脂；芽繁培養的光照強度為2000～3000Lux日光燈照射12小時。

4.根據權利要求1所述的一種雙層包埋的諸葛菜人工種子制作方法，其特征在于，所述步驟(3)中幼芽在芽繁培養基中的生長時間為30天；切取若干個芽的長度為8mm。

5.根據權利要求1所述的一種雙層包埋的諸葛菜人工種子制作方法，其特征在于，所述步驟(3)中內種皮包埋液的成分包括：質量濃度為6％海藻酸鈉水溶膠、0.25-0.3mg/L NAA、10-15g/L nTiO₂、1/2MS培養基、3％蔗糖；外種皮包埋液的成分包括：質量濃度為7％或8％海藻酸鈉水溶膠、30-40g/L nTiO₂、15-30g/L nSiO₂。

6.根據權利要求5所述的一種雙層包埋的諸葛菜人工種子制作方法，其特征在于，所述nTiO₂為銳鈦型納米TiO₂，其粒徑為15±5nm；所述nSiO₂粒徑為15±5nm。

7.根據權利要求5所述的一種雙層包埋的諸葛菜人工種子制作方法，其特征在于，所述內種皮包埋液中NAA為0.25mg/L，nTiO₂為15g/L；所述外種皮包埋液中nTiO₂為30g/L，nSiO₂為15g/L，海藻酸鈉質量濃度為7％。