[發明專利]一種人細胞色素P450CYP2C19和SVIL基因多態性位點檢測試劑盒及用途

在審

• 申請號: 201610463392.4
• 申請日: 2016-06-22
• 公開（公告）號: CN107523610A
• 公開（公告）日: 2017-12-29
• 發明（設計）人: 龍凌云;田鳴
• 申請（專利權）人: 龍凌云;田鳴
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/12;C07K14/47
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司31266
• 代理人: 陳詳,陸鳳

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，具體地涉及一種人細胞色素P450 CYP2C19和SVIL基因多態性位點檢測試劑盒及用途。

背景技術

缺血性心臟病和缺血性腦卒中是世界衛生組織(WHO)公布的全球死因的首要兩位，動脈粥樣硬化、斑塊破裂、血栓形成是心腦血管事件發生的直接原因，而血栓性疾病已成為人類健康的第一殺手，抗血小板治療是預防血栓性疾病的主要手段。

斑塊破裂和血栓形成是導致急性心血管事件的基本病理改變,抗栓尤其是抗血小板治療是急性冠脈綜合征最重要的干預措施。血小板無細胞核、是產生于骨髓巨核細胞胞漿的碎片。其在循環中的最大生存周期約10d。在正常情況下,血小板在血液循環中處于非激活狀態,而當血管內皮損傷或是動脈粥樣硬化斑塊破裂、內皮下的基質暴露、出現活化因子時,血小板即可被激活并在生理止血過程中起重要作用。

抗血小板藥物就是針對血小板激活的各個環節和相關靶點研發而成的,在機制上可作用于血小板激活、黏附、聚集的各個階段。

目前主要使用的藥物有：

環氧化酶(COX)抑制劑：阿司匹林可促進COX-1活性部位第529位絲氨酸乙酰化,不可逆抑制COX-1的活性。COX-1在前列腺素類生物合成的初始步驟中起著關鍵作用,它可催化花生四烯酸轉化為前列腺素H2(PGH2),而PGH2是TXA2的直接前體。阿司匹林抑制COX-1的結果是導致TXA2生成減少,而TXA2是強烈的血小板致聚物,TXA2生成減少終影響到血小板的聚集和釋放反應。

ADP受體抑制劑：氯吡格雷。該藥物口服后在小腸吸收,受到ABCB1基因編碼的質子泵P-糖蛋白調控,吸收后85％-95％被羧化酶水解為非活性的羧酸類代謝產物SR26334,僅10％-15％經肝臟細胞色素P450(CYP450)酶系代謝為活性產物。氯吡格雷活性代謝產物R-130964在經過肝臟循環時通過共價鍵不可逆地和血小板表面的ADP受體(P2Y12)結合,阻斷ADP對腺苷酸環化酶的抑制作用,促進cAMP依賴的VASP磷酸化,抑制纖維蛋白原與血小板糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受體結合,進而抑制血小板的聚集。此外,氯吡格雷還能阻斷繼發的ADP介導的糖蛋白GPⅡb/Ⅲa復合物的活化后引起的血小板活化擴增,從而抑制其他激動劑誘導的血小板聚集。

由于氯吡格雷必須經生物轉化為活性產物才能抑制血小板的聚集。該生物轉化過程需CYP2C19基因編碼的細胞色素P450在肝內代謝完成，活性產物能選擇性地、不可逆地 阻斷二磷酸腺苷依賴的血小板聚集。

不同個體對于氯吡格雷具有不同的反應性，約有40％的亞裔病人在治療后仍顯示出殘留的血小板聚集，即所謂的“氯吡格雷抵抗”。其主要原因是CYP2C19*2，CYP2C19*3 CYP2C19基因突變致使氯吡格雷的活性代謝產物減少導致的。最新臨床研究結果證實CYP2C19基因突變所導致的弱代謝個體，其栓塞重新形成的風險增加，心腦血管事件的發生風險增加，病死率升高。對于CYP2C19基因突變的個體，需要增加氯吡格雷的劑量(負荷劑量為300mg或600mg)，以達到阻斷血小板聚集的效果。

因此，進行基因的突變檢測對于實現抗血小板藥物的個性化用藥，降低心血管疾病的病死率具有重要的臨床意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種SVIL基因多態性位點的檢測試劑及其用途。

本發明的另一目的在于提供SVIL基因多態性位點與人細胞色素P450 CYP2C19多態性位點的組合，或相應檢測試劑及其用途。

本發明的第一方面，提供了SVIL：rs17834991基因位點和/或其檢測試劑的用途，用于制備試劑或試劑盒，所述試劑或試劑盒用于檢測被檢測對象對抗血小板藥物的敏感性。

在另一優選例中，所述抗血小板藥物選自下組：環氧化酶(COX)抑制劑和ADP受體抑制劑。

在另一優選例中，所述抗血小板藥物選自下組：氯吡格雷、阿司匹林或其組合。

在另一優選例中，所述被檢測對象包括：人或非人哺乳動物(如家畜、家禽、實驗動物等)。

在另一優選例中，所述試劑或試劑盒還包括檢測選自下組的一個或多個基因位點和/或其檢測試劑：CYP2C19*2：rs4244285基因位點、CYP2C19*3：rs4986893基因位點、和CYP2C19*17：rs12248560基因位點。

在另一優選例中，所述抗血小板藥物選自下組：環氧化酶(COX)抑制劑和ADP受體抑制劑。