[發明專利]一種藏藥大托葉云實的檢測方法

有效

• 申請號: 201610457228.2
• 申請日: 2016-06-22
• 公開（公告）號: CN105911212B
• 公開（公告）日: 2017-06-30
• 發明（設計）人: 姚文環;程東;孫緒丁;李懷平;姬濤
• 申請（專利權）人: 山東金訶藥物研究開發有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90
• 代理公司: 濟南誠智商標專利事務所有限公司37105
• 代理人: 黎明

1.一種藏藥大托葉云實的檢測方法，其特征在于，包括如下鑒別方法和含量測定方法：

1)鑒別方法

取大托葉云實藥材粉末0.5﹣2g，加鹽酸溶液超聲處理10-40分鐘后，水浴加熱回流1-3小時，取出，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加40-90％乙醇1-4ml，使溶解，過濾，取續濾液，作為供試品溶液；另取大托葉云實對照藥材適量，同法制得對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5﹣10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比3-5﹕1﹕1的正丁醇﹣冰醋酸-水混合溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

2)含量測定方法

色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.05mol/L的檸檬酸鈉為流動相A，體積比為8﹕2的混合溶劑DMF-四氫呋喃為流動相B，采用梯度洗脫，流動相B的時間-濃度變化為：0﹣15分鐘保持1％，15﹣25分鐘由1％升至18％，25﹣45分鐘保持18％，45﹣60分鐘由18％降至1％；檢測波長為280nm；流速：0.8﹣1.2ml/min；理論塔板數以兒茶素計不低于2000；

對照品溶液的制備：取兒茶素、沒食子酸對照品適量，精密稱定，加70％乙醇制成每1ml各含50μg的溶液，即得；

供試品溶液的制備：取大托葉云實粉末0.5﹣5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積比1﹕1的甲醇-6mol/L鹽酸50mL，稱定重量，回流提取30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加入70％乙醇10ml，使溶解，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5﹣10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；

所述的DMF為二甲基亞砜。

2.根據權利要求1所述的藏藥大托葉云實的檢測方法，其特征在于：

所述的鑒別方法步驟如下：

取大托葉云實藥材粉末1g，加6mol/L鹽酸溶液20ml，超聲處理20分鐘后，水浴加熱回流2小時，取出，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加70％乙醇2ml，使溶解，過濾，取續濾液，作為供試品溶液；另取大托葉云實對照藥材適量，同法制得對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比4﹕1﹕1的正丁醇﹣冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

所述的含量測定方法步驟如下：

色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.05mol/L的檸檬酸鈉為流動相A，體積比為8﹕2的混合溶劑DMF-四氫呋喃為流動相B，采用梯度洗脫：0﹣15分鐘流動相B保持1％，15﹣25分鐘流動相B由1％升至18％，25﹣45分鐘流動相B保持18％，45﹣60分鐘流動相B由18％降至1％；檢測波長為280nm；流速：0.8﹣1.2ml/min；分析時間：60分鐘，理論塔板數以兒茶素計不低于2000；

對照品溶液的制備：取兒茶素、沒食子酸對照品適量，精密稱定，加體積比70％乙醇制成每1ml各含50ug的溶液，即得；

供試品溶液的制備：取大托葉云實粉末2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積比1﹕1的甲醇-6mol/L鹽酸50mL，稱定重量，回流提取30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加入70％乙醇10ml，使溶解，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5﹣10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。