[發(fā)明專利]一種利用超高效合相色譜快速檢測白酒中手性乳酸乙酯的方法

有效

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• 申請日: 2016-06-17
• 公開（公告）號: CN105891375B
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發(fā)明（設計）人: 王銀輝;湯有宏;劉國英;沈小梅;馬雷
• 申請（專利權）人: 安徽瑞思威爾科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司34101
• 代理人: 盧敏,何梅生

技術領域

本發(fā)明涉及檢測技術領域，具體地說是一種利用超高效合相色譜串接二極管陣列檢測器同時快速檢測白酒中手性乳酸乙酯(L-乳酸乙酯，D-乳酸乙酯)的方法，屬于分析技術領域。

背景技術

隨著分析檢測技術的不斷發(fā)展，特別是高效毛細管氣相色譜、液相色譜以及氣質、液質聯(lián)用技術的發(fā)展和應用，結合白酒的感官品嘗、探明白酒中骨架成分的種類以及含量，研究其組成特點，有可能逐步揭開各類名酒“獨特風味”的奧秘。眾多研究人員在試圖努力采用最新技術去識別未曾認識的白酒中微量成分甚至痕量成分，以對白酒的風格特色做出判定區(qū)別。

乳酸乙酯是白酒中的骨架成分，在白酒4大酯中是比較重要的一種，含量較高，約為40-200mg/100mL，它與己酸乙酯、乙酸乙酯、丁酸乙酯以及β-苯乙醇構成濃香、醬香、米香以及兼香型白酒的主體香氣成分。在濃香型白酒中要求降低乳酸乙酯的含量，但含量過低，酒味寡淡；含量過高則增加酒的澀味。從分子結構來看，乳酸乙酯含有一個手性碳原子，存在一對手性對映體即L-乳酸乙酯和D-乳酸乙酯。手性對應體化合物具有相同的分子式，分子之間原子連接的順序也完全相同，只是分子中原子在空間中的排列順序不同。對映體的物理性質以及化學性質也相同，但是最重要的特點是生理效能表現不同，例如左旋煙堿比右旋煙堿的毒性更大。在白酒中，L-乳酸乙酯和D-乳酸乙酯可能會引起不同的感官反應，在白酒風味和口感方面起著非常重要的作用。因此，研究白酒中L-乳酸乙酯和D-乳酸乙酯的含量及比例非常重要。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種利用超高效合相色譜儀串接二極管陣列檢測器同時快速檢測白酒中手性乳酸乙酯(L-乳酸乙酯，D-乳酸乙酯)的方法，旨在實現白酒中手性乳酸乙酯檢測的準確判定、快速檢測。

本發(fā)明解決技術問題采用如下技術方案：

本發(fā)明利用超高效合相色譜同時快速檢測白酒中手性乳酸乙酯的方法,其特點在于：

所述手性乳酸乙酯包括L-乳酸乙酯和D-乳酸乙酯；

所用儀器為：配有二極管陣列檢測器的超高效合相色譜儀，ACQUITY UPC2Trefoil CEL1,2.5μm色譜柱(纖維素3-(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯))；渦旋儀；移液槍；

所述方法包括如下步驟：

(1)對待測白酒酒樣進行前處理：

移取5mL待測白酒酒樣于10mL比色管中，加入2mL乙酸乙酯，渦旋1min，移取上層溶液吹干，使用2mL甲醇溶解，注入2mL樣品瓶，待進樣；

(2)設定超高效合相色譜儀的條件為：

色譜柱：ACQUITY UPC2Trefoil CEL1,2.5μm色譜柱(纖維素3-(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯))；柱溫為30～50℃；

樣品室溫度：10～20℃

流動相：A相為二氧化碳，B相為甲醇；流速為2～3mL/min；洗脫方式為梯度洗脫；進樣量為1～5μL；檢測所用時間為5min；ABPR壓力為1885～2200psi；梯度洗脫的具體步驟為：初始時，流動相A和流動相B的體積分數比為98％：2％；由0min到3.0min這一時間段內，流動相A和流動相B的體積分數比從98％：2％逐漸變化為96％：4％；由3min到4.0min這一時間段內，流動相A和流動相B的體積分數比從96％：4％逐漸變化為95％：5％；由4.0min到5.0min這一時間段內，流動相A和流動相B的體積分數比從95％：5％逐漸變化為98％：2％。梯度洗脫各時間的的變化曲線均選擇所用儀器中的曲線6。

二極管陣列檢測器PDA的條件設定為：

3D通道為200nm-410nm；

分離度為1.2～2.0nm；

采樣速率為20～50點/秒

(3)待測白酒酒樣的檢測

將待測白酒酒樣按步驟(1)的方式進行前處理后，按步驟(2)的條件作UPC²檢測，，采用外標法進行測定，用保留時間和峰面積進行定性與定量。具體方式為：

(31)標準曲線的繪制

取L-乳酸乙酯和D-乳酸乙酯配制質量濃度范圍在12.5～300μg/L的混合系列標準工作溶液，然后按照(2)所設定的條件取1.5mL各標準工作溶液進樣，作超高效合相色譜檢測，以待測物的峰面積對其所相應的質量濃度進行線性回歸，獲得兩種手性乳酸乙酯的線性回歸方程，各線性回歸方程所對應的曲線，即為相應手性乳酸乙酯的標準曲線；

具體的，兩種手性乳酸乙酯對應的線性回歸方程及相關系數r²見表1。