[發明專利]氫氧化鉀法總蛋白診斷檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201610446667.3
• 申請日: 2016-06-21
• 公開（公告）號: CN107525774A
• 公開（公告）日: 2017-12-29
• 發明（設計）人: 甘宜梧;李建營;包興艷;譚柏清
• 申請（專利權）人: 山東博科生物產業有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明試劑盒涉及臨床體外檢測試劑技術領域，特別涉及到血清中總蛋白通過氫氧化鉀法進行檢測診斷其含量。

背景技術

血清蛋白是血液中脂肪酸的攜帶者。脂肪酸對身體而言很重要，有兩個方面：它是脂質的主要組成成分，而脂質又構成了細胞周圍和細胞內所有的生物膜；它們又是能量的不竭的源泉。我們的身體有了一個脂肪酸倉庫——脂肪。當身體需要能量或者需要建造材料時，脂肪細胞就把脂肪酸釋放到血液中，脂肪酸被血清蛋白獲取，并被運送到需要的部位。因此可見血清蛋白對機體的重要作用。

雙縮脲試劑檢驗法是臨床使用已久的檢測血清蛋白的方法，尤其以Doumas改良法為主，為各個實驗室及化驗室所采用。Doumas法檢測血清蛋白時，準確度高、精密度強備受關注。但是該方法存在以下缺點：一是當待檢血清樣本中脂類含量偏高，對檢測結果造成極大影響，使得結果偏高；二是對于點滴中含有右旋糖苷的樣本同樣不能進行檢測，主要是由于葡萄糖與雙縮脲試劑中的Cu²⁺發生反應生成紅色物質，嚴重影響了比色測定，不能確定其檢測診斷結果。

市場上目前流通的各種雙縮脲試劑無一不是經過改良之后的，但是尚未見到任何試劑，能夠同時消除高脂和右旋糖酐對診斷檢測帶來的干擾。

鑒于以上問題，我們發明了氫氧化鉀法診斷檢測試劑盒，該方法是在多種堿性物質中選擇的能在很大程度上降低高脂和右旋糖酐帶來的干擾。本發明采用氫氧化鉀和對應濃度的酒石酸鉀鈉溶液，配置成雙試劑診斷檢測試劑盒，在一定程度上克服了高脂和右旋糖酐對血清蛋白檢測帶來的干擾。

發明內容

本發明目的在于提供一種氫氧化鉀法總蛋白檢測診斷試劑盒，有效地解決了雙縮脲試劑不能排除高脂和右旋糖酐帶來的干擾問題，為Doumas方法學的完善提供了新資料。

檢驗原理

具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物，在堿性溶液中能與Cu²⁺發生雙縮脲反應，形成復雜的紫色物質，該物質在波長540nm時有最大光吸收值。血清中總蛋白結構與雙縮脲類似，在堿性條件下同樣能與Cu²⁺發生反應生成紫色的絡合物，絡合物的顏色與蛋白質濃度成正比，與蛋白質的分子量及其氨基酸組成無關，通過記錄在540nm下的吸光度變化，根據標準液濃度來計算所檢測樣本中蛋白的含量。

應用本發明氫氧化鉀法檢測總蛋白試劑盒，測定血清中總蛋白的含量方法如下：檢測波長主波長為540nm、輔波長為700nm，樣本量：試劑R1：試劑R2=5μL:125:μL:125μL。

本發明是一種氫氧化鉀法總蛋白檢測試劑盒，是由試劑R1和試劑R2組成的雙試劑液體型檢測診斷試劑盒，其中

試劑R1組成為：

碘化鉀 2-6g/L

酒石酸鉀鈉 8-16g/L

無水硫酸銅 4-8g/L

丙三醇 1.5-3.0ml/L

疊氮鈉 0.01-0.8g/L

水質穩定劑 0.2-1ml/L

試劑R2組成為：

氫氧化鉀 0.1-0.4M/L

丙三醇 1.5-3.0ml/L

防腐劑 0.01-0.8g/L

羥基乙叉二膦酸 0.2-1ml/L

本發明氫氧化鉀法總蛋白檢測診斷試劑盒，其試劑R1和試劑R2的選擇依據是：

酒石酸鉀鈉作為一種螯合劑，能夠保護絡合物離子狀態的Cu²⁺， 防止Cu²⁺與溶液中多余的OH^-形成CuO沉淀。

碘化鉀作用增加試劑的穩定性，延長試劑使用壽命。

五水硫酸銅可以與蛋白質中的氨基酸之間連接的肽鍵發生雙縮脲反應，生成紫色的絡合物，進而引起吸光度的變化。

氫氧化鉀一是提供一種堿性條件下pH環境，二是K+對于消除高脂和右旋糖酐帶來的干擾影響。

丙三醇是一種保護劑，防止試劑遭受高溫、低溫對溶液產生影響。

疊氮鈉作用防止試劑霉變變質。

羥基乙叉二膦酸能與水中鈣、鎂離子等成垢物質形成穩定的絡合物，易溶于水，起良好的螯合、分散、緩蝕作用，阻止結垢并對老垢層起到疏松作用，便于清垢。

本發明可以應用到迪瑞、邁瑞、日立、東芝等系列的全自動化分析儀中進行自動化檢測。