[發明專利]一種保存淚液的方法

在審

• 申請號: 201610424370.7
• 申請日: 2016-06-15
• 公開（公告）號: CN107509721A
• 公開（公告）日: 2017-12-26
• 發明（設計）人: 高友鶴;秦偉偉
• 申請（專利權）人: 北京師范大學
• 主分類號: A01N1/00
• 分類號: A01N1/00
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司11314
• 代理人: 程偉

技術領域

本發明涉及實驗樣本保存技術領域，具體涉及一種保存淚液的方法。

背景技術

淚液覆蓋在眼表上皮細胞之上，對于眼起到潤滑、保護、營養及完善視覺等重要作用。淚液是一種成分復雜的細胞外液，含有蛋白質、脂質、核酸、小分子代謝物、以及電解質等等。de Souza等人^[1]，在人淚液中鑒定到491個蛋白質。2012年Lei Zhou等人^[2]，通過應用基于色譜分離的深度二維鑒定技術，鑒定到1543個淚液蛋白質。淚液中的脂質由眼瞼上的油脂腺體分泌產生，已鑒定出150種脂質^[3]。目前，在人淚液中鑒定出100種小分子代謝物^[4]。

淚液作為一種重要的體液獲取無創，其改變能夠反應眼部及全身的健康和疾病狀況，是尋找疾病標志物的一種重要來源，干眼癥^[5,6]、結膜松弛癥^[7]、眼瞼炎^[8]、干燥綜合征^[9]、自身免疫性眼病^[10]等。

20世紀90年代后期，生物樣本庫(Biobank)的概念被提出，即標準化收集、處理、儲存和應用健康和疾病生物體的生物大分子、細胞、組織和器官等樣本，包括人體器官組織、全血、血漿、血清、生物體液或經處理過的生物樣本，并用于疾病的臨床治療和生命科學研究的生物應用系統。隨著精準醫學概念的提出，生物樣本庫在疾病診斷、治療的研究中起到越來越重要的角色。淚液作為重要的生物樣本，如果能將其與臨床病歷在疾病的每個階段一同保存下來，那么在未來尋找生物標志物的回顧性和前瞻性研究中，特別是在大規模臨床驗證實驗中，將起到不可估量的作用。

目前，淚液的保存主要是用濾紙條浸潤收集后置于離心管內-80℃凍存，并且在樣本采集地至檢測地運輸過程中，需要在-80℃全程冷鏈。此方法占用存儲空間大、超低溫保存高能耗、樣品遠距離運輸對溫控 要求高。目前的方法不易于樣本的運輸保存，并且運輸過程中如果溫控不合標準容易導致淚液中生物成分的降解。因此，開發出一種簡單廉價、并方便運輸的保存淚液的方法，能使大規模全面保存淚液樣本更加經濟可行。

發明內容

本發明的目的在于提供一種保存淚液的方法，該方法簡單易操作、占用存儲空間小、可室溫保存、淚液中生物成分不易降解丟失，尤其是淚液中的蛋白質不易降解丟失。基于上述目的，本發明提供的一種保存淚液的方法，包括以下步驟：

1)利用濾紙條浸潤收集淚液；

2)對步驟1)中浸潤有淚液的濾紙條進行干燥處理；

3)將步驟2)中干燥后的濾紙條置于密封容器中，抽真空后保存。

作為一個優選的實施方案，所述濾紙條是用于施墨試驗的淚液檢測濾紙條。其中，所述施墨試驗是指用于檢測淚腺分泌功能的試驗。

進一步地，所述淚液檢測濾紙條的大小為4-6mm×35-40mm。

進一步地，在步驟1)中將所述濾紙條置于下眼瞼內非局部麻醉，閉眼3-5min后取出濾紙條，從而浸潤收集淚液。

作為一個優選的實施方案，在步驟2)中，所述干燥處理通過干燥器進行，或者使用電吹風、吹干機或風干機吹干進行。

進一步地，在步驟2)中，所述干燥處理的時間為1min-3min，溫度為25℃-60℃。

作為一個優選的實施方案，在步驟3)中所述密封容器是封裝袋。

作為一個優選的實施方案，在步驟3)中所述保存的溫度為室溫。

作為一個優選的實施方案，所述淚液中含有蛋白質、脂質、核酸、小分子代謝物、和電解質。

進一步地，所述淚液中含有蛋白質。

從以上所述可以看出，本發明提供的保存淚液的方法與傳統的直接凍存淚液樣本的方法相比，保存效果沒有明顯差異。而且該干燥保存方法簡單易操作、占用存儲空間小；最重要的是淚液中生物成分在干燥、真空狀態下可進行一定時間的室溫保存，而不會發生降解丟失。 因此，該方法有利于淚液樣本的遠距離采集和運輸，從而使得低成本、大批量、廣泛收集淚液標本成為可能。

附圖說明

圖1：SDS-PAGE分析結果，其中“C”代表采用傳統方法直接凍存吸收有淚液的濾紙條；“E”代表采用本發明的保存淚液的方法保存濾紙條，其中“1”、“2”、“3”分別代表：1號受試者、2號受試者和3號受試者的淚液樣本。