[發明專利]一種乙酰基人參皂苷Rd及其制備方法

有效

• 申請號: 201610423051.4
• 申請日: 2016-06-15
• 公開（公告）號: CN106046098B
• 公開（公告）日: 2017-07-11
• 發明（設計）人: 李珂珂;弓曉杰;陳麗榮;李沙沙
• 申請（專利權）人: 大連大學
• 主分類號: C07J17/00
• 分類號: C07J17/00
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司21212
• 代理人: 周媛媛,李馨

技術領域

本發明公開一種從人參花蕾中提取和分離乙酰基人參皂苷Rd(Ac-Rd)的制備方法，屬于中藥單體提取技術領域。

背景技術

人參皂苷是人參的主要活性成分，在人參的根、莖、葉、花和果實中均含有人參皂苷，但各個部位中人參皂苷的種類和含量不同。人參地上部分是不可忽視的寶貴資源，其中人參花蕾是人參含苞待放的花，人參花中的總皂苷含量最高(約5～7％)，部分單體皂苷的含量超過人參根中的十倍(如人參皂苷Re)。研究發現，人參地上部分皂苷成分的藥理活性與人參根總皂苷相似，因此人參地上部分尤其是人參花具有很好的藥物開發利用前景。迄今為止已從人參各部位分離鑒定的單體人參皂苷已有200余種，其中乙酰基人參皂苷是在葡萄糖基的6位鏈接一個乙酰基，使得該人參皂苷的極性變小，親水性變弱。但分子中的乙酰基不穩定，易發生水解反應。

現已分離得到的乙酰基人參皂苷主要有Ac-Rg₁，20(S)-Ac-Rg₂，20(R)-Ac-Rg₂，已有通過乙酰化反應的手段得到乙酰基人參皂苷Rd，但尚未有從天然植物中分離得到其單體。

發明內容

本發明提供了一種乙酰基人參皂苷Rd及其制備方法，能夠簡單、高效、快速提純乙酰基人參皂苷Rd。

本發明所述的一種乙酰基人參皂苷Rd，具有以下結構式：

白色粉末；分子式：C₅₀H₈₄O₁₉；分子量：988；mp 125-127℃。

名稱：3β,12β,20S-三羥基-達瑪-24-烯3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-6”-乙酰基-20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，即乙酰基人參皂苷Rd。

本發明所述的一種乙酰基人參皂苷Rd的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1)提取：取新鮮干燥后的人參花蕾，粉碎，用98％-100％甲醇溶液進行提取，減壓濃縮制成相對密度為1.1的浸膏；

2)萃取：取濃縮浸膏加蒸餾水溶解，依次用環己烷、乙酸乙酯萃取，待被兩種溶劑萃取完全后，將余下的浸膏減壓回收溶劑，即得到含人參皂苷類化合物的水層萃取液；

3)富集：將上述得到的萃取液加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，先以水洗脫掉提取液中的糖和無機鹽類，再以60％甲醇洗脫得到含乙酰基人參皂苷Rd的富集液；

4)中壓MCI GEL柱層析：將上述所得富集液經MCI GEL柱層析除去部分色素和雜質，用甲醇水進行洗脫，根據TLC檢查合并乙酰基人參皂苷Rd洗脫液；

5)制備：將上述洗脫液經旋轉蒸發儀減壓濃縮后上高效制備液相，以甲醇水進行洗脫，根據紫外檢測器譜圖接收目標組分，洗脫液用旋轉蒸發儀旋干，冷凍干燥后即得乙酰基人參皂苷Rd。

作為本發明的優選方案，所述步驟5)中，色譜柱為C18反相硅膠色譜柱，其填料粒徑3-5μm，色譜柱內徑25-30mm，柱子長度250-300mm。

作為本發明的優選方案，所述步驟1中的甲醇用量為人參花蕾重量的3-5倍，所述提取方法為加熱回流提取，提取時間為每次2h，提取次數為3-5次，濃縮溫度控制在40-50℃。

作為本發明的優選方案，所述步驟2中溶解浸膏所用的水的量是浸膏重量的0.2-0.5倍。

作為本發明的優選方案，所述步驟3中所用的大孔吸附樹脂為Diaion HP-20、D101或HPD100等非極性樹脂，所用的洗脫溶劑為60％甲醇。

作為本發明的優選方案，所述步驟4中所用中壓MCI GEL柱層析所用的填料為MCI GEL F型，粒度50-70u，洗脫劑甲醇水的比例依次是60％、80％，流速為5-8mL/min。

作為本發明的優選方案，所述步驟5中采用以70％甲醇水溶液進行恒梯度洗脫。

目前尚未見到有關乙酰基人參皂苷Rd的提取方法的報道，該化合物屬于新天然產物，屬于在天然植物中首次分離制備得到。

發明有益效果