[發(fā)明專利]鐵皮石斛組的培育方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610421183.3
• 申請日: 2016-06-16
• 公開（公告）號: CN107509633A
• 公開（公告）日: 2017-12-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 何聲斌;蔡永萍;梁峰;張娟;王玲玲;何彬
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽霍山鵬飛現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及鐵皮石斛組的培育方法。

背景技術(shù)

鐵皮石斛是一種名貴的中草藥材，唐代醫(yī)學(xué)經(jīng)典《道藏》中，鐵皮石斛被列為“中華九大仙草”之首，它作為養(yǎng)生保健的極品，為歷代醫(yī)家推崇倍至。但因其生長周期緩慢，極難存活，且被人工大量開采，野生鐵皮石斛瀕臨滅絕。因些，人工栽培就成為一種既能保護(hù)瀕危資源又可以滿足人們需要的良好措施。為了獲得高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的鐵皮石斛，必須人為創(chuàng)造一個優(yōu)越的生長環(huán)境，使種植條件基本接近其野生的環(huán)境氣候條件，以滿足它的生長需要，而培養(yǎng)基的選擇對鐵皮石斛移栽的成活率、生長、繁殖和產(chǎn)量影響很大，因此移栽前鐵皮石斛的培育至關(guān)重要。同時，它的根是氣生根，有明顯的好氣性和淺根性，在移栽后的基質(zhì)要以疏松透氣、排水良好、不易發(fā)霉、無病菌，無害蟲潛藏者為宜。

鐵皮石斛喜溫暖、多霧、微風(fēng)、清潔、散射光環(huán)境，忌陽光直射和曝曬。在移栽過程中要創(chuàng)造條件為鐵皮石斛創(chuàng)造最佳的生長環(huán)境。鐵皮石斛原產(chǎn)區(qū)大多處于溫帶和亞熱帶，全年氣候溫暖、濕潤，冬季溫度在0℃以上。根據(jù)鐵皮石斛的生長習(xí)性，要考慮場地的光照、溫度、濕度、通風(fēng)等自然因素。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了克服以上的不足，提供一種種子萌芽率高，異變率低，苗株成活率高，長勢好，病變率低，經(jīng)濟(jì)效益高的一種鐵皮石斛組的培育方法。

本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)，鐵皮石斛組的培育方法，依次包括以下步驟，

1）繁殖，

a. 原球莖誘導(dǎo)

將采集的成熟種子，用洗潔精把種子表面洗凈，在自來水下沖洗 10 -15min ，然后用 75 % 酒精消毒 30-35s，無菌水清洗 3 -5遍，接著用 0.1% 升汞消毒 10-12 min ,再用無菌水沖洗 4-5 遍；配置MS、 糖 30g/L、 卡拉膠 8.6 g/L 、2g/L椰子汁的混合物作為播種培養(yǎng)基，然后將播種于培養(yǎng)基中暗培養(yǎng) 7-10d，待種子開始萌發(fā),顏色有點(diǎn)發(fā)白,將萌發(fā)的種子放于光照下培養(yǎng)；20d左右后取原球莖，配置1／2MS+6-BA 2.2 mg/L+NAA的混合液作為增殖培養(yǎng)基，將取出的原球莖接種到增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng) 30-35d；

b.原球莖分化

配置分化培養(yǎng)液：MS+BA 1mg/L+NAA 0.1 mg/L+土豆 20 g/L+ 糖 30 g/L+ 卡拉膠 8.6 g/L，將長勢良好深綠色、表面有茸毛狀物、結(jié)實(shí)的顆粒狀原球莖轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基中，在轉(zhuǎn)接時盡量不要把原球莖分散，使整個顆粒直接放入，培養(yǎng)周期30-32 d；

c.芽的增殖

配置芽增殖營養(yǎng)液：B 5 +BA 0.1mg/L+NAA 0.5 mg/L+CM150mg/L+ 糖 25g/L+土豆 10 g/L+卡拉膠 8.6g/L ，原球莖在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)30天左右后，把長勢好的叢芽分成 3-4 株 / 叢接入芽增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)45 -50d，剩余細(xì)小的叢芽分成單株，讓其繼續(xù)在分化培養(yǎng)基中生長到 8 cm 左右，再切成 2 cm 左右長的莖段平放接種于芽增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)40 -45d，培養(yǎng)時需日光燈照射，光照強(qiáng)度 0-50μmol/(m · s) ，光照時數(shù)為 10-12h/d，溫度控制在25±1；

d. 壯苗與生根

配置生根培養(yǎng)基：B 5 +IBA 2 mg/L+ 香蕉 15g/L+糖 30g/L+ 卡拉膠 8.6g/L+異噻唑啉酮0.5g/L，培養(yǎng)基 pH 為 5.6-5.8 ， 培養(yǎng)溫度 25 ℃ ，挑選出3 cm 或者 3 cm 以上叢苗，將挑選出的叢苗和單株培養(yǎng)的苗放入生根培養(yǎng)基中， 培養(yǎng)40-45d，所述培養(yǎng)基中加入少量活性炭，培養(yǎng)時需日光燈照射， 光照強(qiáng)度 0-50μmol/(m · s) ，光照時數(shù)為 10-12h/d，溫度控制在25±1° ；

2）選苗

挑選出生長健壯、葉色正常的苗：根長需達(dá)到3cm以上，有4~5條根，根皮色白中帶綠，無黑色根，無畸形，無變異，肉質(zhì)莖有3~4個節(jié)間、長有4~5片葉；

3）出瓶

組培苗出瓶時，將培養(yǎng)基與小苗一起輕輕取出，整齊放置于盆中待清洗，污染苗、裸根苗或少根苗分別放置；正常組培苗先在清水中洗凈培養(yǎng)基，特別要洗掉瓊脂，以免瓊脂發(fā)霉引起爛根，再換清水清洗一到兩次次；裸根或少根組培苗經(jīng)過上述清洗后，還需將小苗根部置于100mg/L的ABT生根粉中浸泡15-20分鐘，以進(jìn)行生根誘導(dǎo)；污染苗經(jīng)過清洗后，用1000倍多菌靈浸泡整株小苗10-15分鐘；出瓶移苗的日平均氣溫應(yīng)為15~30℃，出苗時需用鑷子將組培苗小心取出；

4）栽培