[發明專利]華法林-4-O-乙酰-二肽,其合成,活性和應用

有效

• 申請號: 201610412840.8
• 申請日: 2016-06-13
• 公開（公告）號: CN107488210B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 彭師奇;趙明;吳建輝;王玉記;張薪
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學
• 主分類號: C07K5/068
• 分類號: C07K5/068;C07K5/072;C07K1/06;C07K1/02;A61K38/05;A61P7/02
• 代理公司: 北京思元知識產權代理事務所(普通合伙) 11598
• 代理人: 余光軍

本發明公開了華法林?4?O?乙酰?Arg?Asp和華法林?4?O?乙酰?Asp?Arg，公開了它的制備方法,公開了它的抗動脈血栓活性，公開了它的抗靜脈血栓活性，公開了它們降低體內維生素K的含量的活性，公開了它降低體內凝血因子Ⅱ的含量的活性，公開了它們抑制血小板聚集的活性。因而本發明公開了它們在制備抗動脈血栓藥物中的應用、在制備抗靜脈血栓藥物中的應用、在制備抑制血小板聚集藥物中的應用、在制備維生素K拮抗劑中的應用和在制備凝血因子II拮抗劑中的應用。

技術領域

本發明涉及華法林-4-O-乙酰-Arg-Asp和華法林-4-O-乙酰-Asp-Arg,,涉及它們的制備方法，涉及它的抗動脈血栓活性，涉及它的抗靜脈血栓活性，涉及它降低體內維生素K的含量的作用，涉及它降低體內凝血因子Ⅱ的含量的作用，涉及它抑制血小板聚集的作用，涉及它下調體內血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)受體表達的作用。因而本發明涉及它在制備抗動脈血栓藥物中的應用、在制備抗靜脈血栓藥物中的應用、在制備抑制血小板聚集藥物中的應用、在制備維生素K拮抗劑中的應用和在制備凝血因子II拮抗劑中的應用。本發明屬于生物醫藥領域。

背景技術

動脈血栓和靜脈血栓兩種病癥已成為當下發病率高和死亡率高的疾病。其中靜脈血栓癥主要包括深靜脈血栓和肺栓塞。深靜脈血栓和肺栓塞發病的患者數超過了心肌梗塞和中風發病的總人數，而且比乳腺癌和艾滋病所引起死亡的總人數高。由于動脈血栓癥和靜脈血栓癥的發病率隨年齡增長呈指數態增加，所以兩種病癥對我國這樣的老齡化國家的人民健康的威脅尤其嚴重。如果把人口基數考慮進去，對我國國計民生的絕對負面影響尤其嚴重。于是，動脈血栓癥與靜脈血栓癥的預防及治療一直是醫藥領域所關注的重點。雖然華法林作為代表藥物于1941年被用于臨床實踐，但是由于華法林的活性由它的藥代動力學特點、凝血因子代謝以及維生素K的可用性的共同的復雜作用來表現。華法林的量效關系表現出很大的可變性，這也就說明華法林的抗凝治療有一個很大的劑量范圍，并且表現出很大的個體差異。由于華法林的窗口窄，其劑量不足會有導致肺栓塞的可能，而劑量過量有導致致命性出血的風險。過去的50多年對華法林進行了大量結構改造，卻都沒有能夠得到抗靜脈血栓活性強和出血副作用低的類似物。與傳統的思維不同，發明人修飾華法林結構的目標是，將華法林轉化為具有抗動脈血栓和抗靜脈血栓雙重活性的類似物。不過，也一直未能如愿。之后，又經過5年探索，發明人發現華法林的4位用乙酰-Arg-Asp或乙酰-Arg-Asp修飾，生成的華法林-4-O-乙酰-Arg-Asp和華法林-4-O-乙酰-Asp-Arg在體外抗血小板聚集模型上顯示優秀的抗血小板聚集活性。顯然，它們不是華法林的前藥。華法林-4-O-乙酰-Arg-Asp和華法林-4-O-乙酰-Asp-Arg的抗動脈血栓活性比阿司匹林強167倍，抗靜脈血栓活性比華法林強48.7倍。可見，本發明具有顯著的技術進步。于是，發明人提出本發明。

發明內容

本發明的第一個內容是提供華法林-4-O-乙酰-Arg-Asp和華法林-4-O-乙酰-Asp-Arg。

本發明的第二個內容是提供華法林衍生物的合成方法，該方法包括：

1.合成華法林-4-O-乙酸芐酯；

2.合成華法林-4-O-乙酸；

3.以保護氨基酸為原料，采用DCC為縮合劑，HOBt為催化劑的液相縮合的方法以逐步縮合的方式合成Boc-Arg-Asp(OBzl)-OBzl和Boc-Asp(OBzl)-Arg(NO₂)-OBzl。再用4N氯化氫的乙酸乙酯溶液將其Boc保護基脫除，得到Arg-Asp(OBzl)-OBzl和Asp(OBzl)-Arg(NO₂)-OBzl；

4.華法林-4-O-乙酸與Arg-Asp(OBzl)-OBzl或Asp(OBzl)-Arg(NO₂)-OBzl偶聯得到華法林-4-O-乙酰-Arg-Asp(OBzl)-OBzl或華法林-4-O-乙酰-Asp(OBzl)-Arg(NO₂)-OBzl；