[發明專利]同一體系構建兩種比率電化學傳感器檢測抗腫瘤藥物方法

有效

• 申請號: 201610408213.7
• 申請日: 2016-06-12
• 公開（公告）號: CN106124581B
• 公開（公告）日: 2018-04-27
• 發明（設計）人: 桂日軍;趙春芹;金輝;王宗花;徐顯朕
• 申請（專利權）人: 青島大學
• 主分類號: G01N27/27
• 分類號: G01N27/27;G01N27/48
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司37221
• 代理人: 曹麗

技術領域

本發明涉及電化學、生物學和醫學等相關技術領域，具體涉及同一體系構建兩種比率電化學傳感器檢測抗腫瘤藥物方法。

背景技術

臨床上經常用的蒽環霉素類抗腫瘤抗生素，如鹽酸阿霉素(Doxorubicin Hydrochloride,DOX)，鹽酸柔紅霉素(Daunorubicin hydrochloride,DNR)，道諾霉素(Daunomycin,DNM)和表鹽酸阿霉素(Epirubicin,EPI)，主要通過抑制癌細胞遺傳物質核酸的合成，對各種生長周期的腫瘤細胞都具備殺滅作用。此類藥物在臨床上廣泛用于治療多種惡性腫瘤，既可用于治療急慢性白血病和惡性淋巴瘤，也可用于治療乳腺腫瘤、甲狀腺腫瘤等實體瘤。然而，此類藥物在治療過程中往往產生抑制骨髓造血功能和延緩性心臟毒性等副作用，臨床上需要監測其在體內的藥物濃度，調整化療方案，以達到理想的治療效果。因此，測定體液中的抗腫瘤藥物，尤其是血漿樣品中抗腫瘤藥物的濃度對于用藥安全尤為重要。

有關蒽環霉素類抗腫瘤藥物的檢測方法已有相關研究報道，主要包括光譜法、色譜法、毛細管電泳法等，但這些傳統的檢測方法普遍存在操作復雜、選擇性差和靈敏度低等缺陷。相比而言，電化學分析方法因其操作簡單、檢測快速、選擇性和靈敏度高等優點，具備了廣泛的應用潛力。傳統的采用單一電信號構建的電化學分析方法因背景電流干擾，降低了對目標物測定的準確性。當前，發展一種簡便、靈敏和高效的抗癌藥物檢測方法具有十分重要的現實意義。

發明內容

本發明的目的就是為了解決上述問題，提供一種同一體系構建兩種比率電化學傳感器檢測抗腫瘤藥物方法，該方法操作簡單，條件溫和，抗干擾，穩定性和靈敏度高。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種同一體系構建兩種比率電化學傳感器，以裸玻碳電極為載體材料，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲電極為對電極構成三電極系統，電解液體系中直接添加兩種電流峰位置與待測物質不同的電化學活性物質的溶液標樣，從而構建出同一體系中待測物質與每一種電化學活性物質的兩種比率電化學傳感器。

同一體系構建兩種比率電化學傳感器檢測抗腫瘤藥物方法，步驟如下：

(1)電極預處理：將玻碳電極進行打磨、清洗處理；

具體步驟為：將玻碳電極打磨拋光成鏡面，依次經無水乙醇、二次蒸餾水超聲清洗，干燥后得到處理干凈的玻碳電極。

(2)待測溶液的配制：在電解池中加入磷酸鹽緩沖溶液，然后分別加入配制好的抗腫瘤藥物，以及另外兩種電流峰位置與抗腫瘤藥物不同的電化學活性物質的溶液標樣，將三者混合均勻后電解液溶液備用；

(3)溶液中抗腫瘤藥物濃度檢測：將處理好的玻碳電極作為工作電極，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲電極為對電極構成三電極系統，在配制好的電解質溶液中穩定一段時間后進行方波伏安法檢測；

(4)數據的處理：將得到的不同濃度抗腫瘤藥物的峰電流分別與另外兩種電流峰位置不同的電化學活性物質的峰電流做比值得I₁、I₂，以I₁、I₂分別對抗腫瘤藥物濃度作線性回歸方程，繪制工作曲線。

(5)實際樣品中抗腫瘤藥物濃度檢測：采用同步驟(1)-(3)對加有抗腫瘤藥物的血清樣品中的抗腫瘤藥物進行檢測，將得到的抗腫瘤藥物峰電流分別與另外兩電化學活性物質的峰電流作比值，代入線性回歸方程即得樣品中抗腫瘤藥物濃度。

優選：所述步驟(1)中電極采用在麂皮上依次用0.3μm，0.05μm的氧化鋁粉末打磨；所述超聲清洗時間為20～60s；所述干燥為采用氮氣流吹干。

優選：所述步驟(2)中磷酸鹽緩沖液濃度為1～10mM，pH為5.5～7.4；抗腫瘤藥物為鹽酸阿霉素，鹽酸柔紅霉素，道諾霉素或表鹽酸阿霉素；其它電化學活性物質為亞甲基藍、硫堇、耐爾藍或二茂鐵，對應的溶劑前三種為蒸餾水，二茂鐵為無水乙醇；抗腫瘤藥物與其它電化學活性物質溶液標樣濃度分別為100～400μM和400～8000μM。

優選：所述步驟(3)中三電極系統在電解質溶液中穩定時間為30～180s；方波伏安法檢測時初始電位設置為-1.1～0.9V，終止電位為0.4～0.6V。

優選：所述步驟(5)中實際樣品為用10mM PBS稀釋10倍的健康人體血清，唾液，尿液；加入抗腫瘤藥物的實際樣品中藥物的實際濃度為0.01～6μM。

上述傳感器或方法在研究藥物安全中的應用。