[發明專利]一種檢測牛奶中殘留氨基糖苷類抗生素的前處理方法

在審

• 申請號: 201610397206.1
• 申請日: 2016-06-07
• 公開（公告）號: CN107478754A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 李嫣;馮嘉楠;佘曉健;何心瑩
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/08
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙)31268
• 代理人: 吳桂琴

1.一種檢測牛奶中殘留氨基糖苷類抗生素的前處理方法，其特征在于，其包括步驟：

（1）合成3-縮水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷（GLYMO）-氨基苯硼酸（APB）：在低溫下進行反應投料而后升溫反應，將GLYMO上連接APB；

（2）合成介孔磁性石墨烯復合材料：將石墨烯均勻分散在濃硝酸中進行酸化處理后，在所得的酸化石墨烯表面通過反應修飾以四氧化三鐵微球得到磁性石墨烯，再在其上一步包覆介孔硅；

（3）合成硼酸修飾的介孔磁性石墨烯復合材料：向GLYMO-APB溶液中加入介孔磁性石墨烯復合材料，升溫反應完成對材料的硼酸修飾；

（4）利用硼酸修飾的介孔磁性石墨烯復合材料提取富集牛奶中的氨基糖苷類抗生素：向粗去蛋白及脂肪的牛奶基質中加入所得的復合材料，混合使目標分子進入材料孔道內壁并與硼酸基團結合，在磁場作用下收集結合了目標分子的材料，再向收集的材料中加入洗脫液將目標分子洗脫下來，洗脫液過濾后直接進行色譜檢測。

2.根據權利要求1所述的前處理方法，其特征在于，所述方法中，將10-500 mg APB溶解于10-100 mL 溶劑中，調節溶液pH至8-10。

3.根據權利要求1所述的前處理方法，其特征在于，所述方法中，GLYMO投料過程反應體系溫度為0 -10℃。

4.根據權利要求1所述的前處理方法，其特征在于，所述方法中，低溫下向APB溶液中滴加10-150 μL的GLYMO，再將反應體系升至20-80℃并攪拌反應3-10 h。

5.根據權利要求1所述的前處理方法，其特征在于，所述方法中，加入GLYMO 繼續與APB 反應，重復1-5次得到GLYMO-APB溶液。

6.根據權利要求1所述的前處理方法，其特征在于，所述方法中，GLYMO水解產生的沉淀由離心或過濾去除，收集上GLYMO-APB溶液，低溫儲存。

7.根據權利要求1所述的前處理方法，其特征在于，所述方法中，取20-200 mg取磁性石墨烯與0.1-2.0 g十六烷基三甲基溴化銨分散在水中，調節pH至弱堿性，30-80℃加熱攪拌下加入1.0-6.0 mL正硅酸乙酯與乙醇的混合物，體積比0.2-10.0，后繼續加熱攪拌反應6-18小時，所得無官能團修飾的介孔磁性石墨烯復合材料以丙酮在20-70℃下洗去介孔模板劑CTAB。

8.根據權利要求1所述的前處理方法，其特征在于，所述方法中，向5-100 mL GLYMO-APB溶液中加入5-200 mg 介孔磁性石墨烯復合材料后在30-80℃ 下攪拌反應0.5-10 h，再加入5-100 mL GLYMO-APB溶液重復1-5次。

9.根據權利要求1所述的前處理方法，其特征在于，所述方法中，向0.5-5 mL牛奶基質中加入1-100 mg 硼酸修飾的介孔磁性石墨烯復合材料，超聲或渦旋或震蕩混合0.1-20分鐘。

10.根據權利要求1所述的前處理方法，其特征在于，所述方法中，對吸附了目標分子的材料，加入0.1-10 mL 洗脫溶劑并混合0.1-15分鐘進行洗脫。