[發明專利]一種發酵菊糖產低聚果糖的釀酒酵母及其構建方法與應用

在審

• 申請號: 201610390430.8
• 申請日: 2016-06-03
• 公開（公告）號: CN107460137A
• 公開（公告）日: 2017-12-12
• 發明（設計）人: 王達;王士安;李福利
• 申請（專利權）人: 中國科學院青島生物能源與過程研究所
• 主分類號: C12N1/19
• 分類號: C12N1/19;C12P19/12;C12P19/04;C12P19/00;C12R1/865
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司21002
• 代理人: 李穎,周秀梅

1.一種發酵菊糖產低聚果糖重組釀酒酵母，其特征在于：發酵菊糖產低聚果糖重組釀酒酵母JZHΔS-TSC，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.10518，保藏日期為2015年2月4日。

2.一種權利要求1所述的發酵菊糖產低聚果糖重組釀酒酵母的構建方法，其特征在于：在釀酒酵母染色體Ty1轉座位點整合表達分泌型外源菊糖內切酶基因InuC，并敲除蔗糖酶基因，同時優化表達菊糖內切酶基因的密碼子，再進一步使用組成型啟動子，進而獲得發酵菊糖產低聚果糖重組釀酒酵母。

3.按權利要求2所述的發酵菊糖產低聚果糖重組釀酒酵母的構建方法，其特征在于：以野生型釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae JZH為出發菌株，在染色體Ty1轉座位點表達分泌型外源菊糖內切酶基因InuC，并敲除蔗糖酶基因SUC2，同時優化表達菊糖內切酶基因InuC的密碼子，再進一步使用組成型TEF1啟動子，進而獲得發酵菊糖產低聚果糖重組釀酒酵母JZHΔS-TSC。

4.一種權利要求1所述的發酵菊糖產低聚果糖重組釀酒酵母應用，其特征在于：所述重組釀酒酵母作為生產低聚果糖的菌種的應用。

5.一種權利要求1所述的重組釀酒酵母菌株發酵菊糖產低聚果糖方法，其特征在于：

1)接種發酵菊糖產低聚果糖重組釀酒酵母JZHΔS-TSC至YPD培養基中，在30-40℃、100-300rpm條件下培養48-60小時，作為種子液；

2)將種子液按照5-10％(v/v)接種量，接種至100-300g/L菊糖溶液中，于35-40℃、100-200rpm攪拌，厭氧發酵18-36小時；

3)發酵自然沉淀，收獲上清液即為富含低聚果糖溶液。